中药合剂治疗佐剂性关节炎大鼠的拆方实验研究论文.docVIP

　　中药合剂治疗佐剂性关节炎大鼠的拆方实验研究论文 .freelost used in rheumatoid arthritis such as diaphoretics (ephedra), onkshood), blood activating drugs (angelica) and pound mixture in treating adjuvant arthritis,.freelon tixture, monkshood-aconitum mixture, angelica- chuanxiong mixture, herbs pound mixture, loixture entioned herbs and semblable function herbs. pare al group, model group, tripterygium easured by ELISA and spectrophotometer. ultiskan MK3酶标仪(北京惠安泽泰科技有限公司)、TU-1900紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)、光学显微镜、电子天平。弗氏不完全佐剂(美国Sigma公司产品)；肿瘤坏死因子试剂盒(深圳晶美生物工程有限公司产品)；卡介苗(北京生物制品研究所)。 1.4 方法 1.4.1 动物模型的制作 将卡介苗80 ℃ 1 h灭活后,与弗氏不完全佐剂配成卡介苗浓度为10 g/L的乳剂,充分碾磨混匀,即得弗氏完全佐剂(FCA),于每鼠右后足跖皮内注射0.1 mL致炎。 1.4.2 分组与给药 将80只大鼠用随机数字法分为8组：正常对照组、模型组、雷公藤组、复方组、低剂量复方组、祛风湿组、解表组、活血组,每组10只。从致炎开始给药,正常组给予灌胃蒸馏水4 mL/d；模型组灌胃等量蒸馏水；雷公藤组灌胃雷公藤悬浊液40 mg/(kg·d)；祛风湿组灌胃川草乌合剂2.7 g/(kg·d)；活血组灌胃归芎合剂10.5 g/(kg·d)；解表组灌胃麻桂合剂8 g/(kg·d)；复方组灌胃复方合剂21.2 g/kg (以上各组给药量均为70 kg体重人用量的5倍),低剂量复方组灌胃半量复方合剂10.6 g/kg。给药时间均为25 d。 1.4.3 足爪前列腺素E2的检测3 致炎后25 d脱臼处死大鼠,在踝关节上0.5 cm处剪下炎性足爪,称重,剪碎组织,生理盐水5 mL,浸泡24 h,离心浸泡液,吸取上清液0.2 mL,加入0.5 mL/L KOH-甲醇溶液2 mL,在50 ℃下异构化2O min,用甲醇稀释至10 mL,于278 nm波长处测定其光密度(A)值。结果以每克炎性组织相当的吸光密度值表示PGE2的含量。 1.4.4 肿瘤坏死因子α的检测 取大鼠足爪同上,其余步骤按试剂盒说明书步骤操作完成。 1.4.5 免疫脏器的检测 于实验第25日处死大鼠后取脾脏、胸腺后称脏器湿重,计算脏器指数(脏器湿重/动物体重×100%)。 1.4.6 统计学方法 计量资料以—x±s表示。各参数的比较使用SAS9.0统计软件,程序检验各组间差异显著性,组间比较采用dunt检验。 2 结果 2.1 一般情况 造模后第2日,除正常组外,所有大鼠出现造模局部(原发侧)红肿,伴皮温升高,精神萎靡,食欲减退,体重减轻,皮毛颜色暗淡。造模12 d,大鼠在不同程度上出现对侧后肢继发性肿胀,少数前肢也出现继发性肿胀,耳朵出现结节。 2.2 各中药组对佐剂性关节炎大鼠前列腺素E2的影响 致炎后第25日,利用分光光度法检测局部足爪PGE2的含量。结果见表1。 2.3 各中药组对佐剂性关节炎大鼠肿瘤坏死因子α的影响 致炎后25 d采用ELISA法检测足爪中TNF-α水平,结果发现：各治疗组TNF-α均高于正常组,模型组TNF-α水平远远高于正常(P 0.01),雷公藤组、复方组、祛风湿组TNF-α水平又明显低于模型组(P 0.01)。结果见表1。表1 各中药组对AA大鼠足爪PGE2及TNF-α的影响(略)注：与模型组比较,*P 0.05,**P 0.01；与正常组比较,▲P 0.05,▲▲P 0.01(下同) 2.4 各中药组对佐剂性关节炎大鼠免疫脏器的影响 造模后各组脾脏指数均有高于正常组的趋势,说明造模后大鼠免疫功能紊乱,其中模型组与低剂量复方组脾脏指数升高明显(P 0.05),造模后各组胸腺指数与正常组比较有升高趋势,但差异不够明显(P 0.05)。结果见表2。表2 各中药组对AA大鼠免疫脏器的影响(略) 3 讨论 RA是一种以关节滑膜炎症为主要病理表现的慢性自身免疫性疾病，为临床常见病、多发病、难治病,致残率高。AA是常用来研究RA的动物模型,在本实验中,大鼠出现了