二精丸提取工艺的实验研究论文.docVIP

　　二精丸提取工艺的实验研究论文 喇孝瑾，白素芬，刘倩，喇万英 【摘要】 目的优选二精丸的提取工艺。方法采用水提醇沉法，以浸膏得率和多糖含量为指标，用正交实验法优选工艺条件。结果最佳条件为：药材脱脂后，加10倍量水于80℃水浴中温浸3次，每次2h.freelin-1)20 min，合并上清液。加入乙醇使含醇量为80%。 结论优选工艺稳定，安全，简便易行。 【关键词】 二精丸； 正交实验； 提取工艺； 水提醇沉 Abstract：ObjectiveTo establish the optimal extraction technology of Erjing Pill. MethodsOrthogonal test design al extraction process arinated 0.5 h, immersed 3 times and 2 h each time in al technology of Erjing Pill is simple, stable and effective. Key barbarum L.的干燥成熟果实，百合科植物黄精Polygomatum sibiricum Red.的干燥根茎。 2 方法与结果 2.1 水提工艺条件的优选 2.1.1 正交实验设计根据二精丸组方功效和生产实际要求，拟定影响浸出效果的3个主要因素A(水浸时间)，B（水浴温度），C（提取次数）为优选因素，每个因素3个水平进行L9(34)正交实验。正交设计见表1。以处方比例称取烘干后粉碎的药材20 g，混匀，脱脂。室温下加95%乙醇100 ml浸泡0.5 h，加热回流1h，过滤，残渣加100 ml 80%乙醇回流1h，过滤。按表1设计的工艺条件，加入10倍量水于水浴中温浸，离心(3 000 r·min-1)20 min，残渣继续加10倍量水于水浴中温浸，离心，合并上清液。表1 正交实验因素水平（略） 2.1.2 浸膏得率测定精密吸取水提液10 ml置于已称重的蒸发皿中，水浴蒸干，105℃真空干燥3 h，置干燥器中，冷却至室温后，迅速精密称重，计算浸膏得率。结果见表2。表2 二精丸多糖正交实验结果（略） 2.1.3 多糖含量测定 对照品溶液的配制：精密称取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品3 mg，置10 ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成每毫升中含无水葡萄糖0.3 mg的对照品溶液。 标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1 ml，分别置10 ml具塞刻度试管中，各加水至2.0 ml，摇匀，在冰水浴中缓慢滴加0.2% 蒽酮-硫酸溶液至刻度，摇匀，冷却后置沸水浴中保温10 min，取出，立即置冰水浴中冷却10 min，取出，以相应试剂为空白。照紫外-可见分光光度法，在490 nm波长处测定吸光度。 以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，Y= 3.928 7X+ 0.072 3，r=0.999 1。结果表明无水葡萄糖在0.036～0.36 g·L-1范围内，其质量浓度与吸收度线性关系良好。 供试品溶液的制备：取干燥后的二精丸多糖0.01 g，加蒸馏水溶解，定容于250 ml量瓶中，摇匀。即得供试品溶液。 精密度实验：精密吸取对照品溶液6份各0.2 ml，分别置10 ml具塞干燥试管中，照线性关系考察项下方法，自“加水至2.0 ml”起依法操作，测定吸收度。结果RSD为1.08%，表明精密度良好。 稳定性实验：精密移取样品液0.2 ml，按标准曲线项下方法操作，每30 min测一次吸光度,测得平均吸光度为0.168，RSD为2.59%，测定值在120 min内保持稳定。 样品含量测定：精密量取供试液1 ml,按“标准曲线”项下操作,测定吸光度值，并代入回归方程，计算多糖含量。结果见表2。方差分析见表3～4。表3 二精丸多糖浸膏得率方差分析，表4 二精丸多糖含量方差分析（略）。 直观分析表明，以多糖含量为指标，理论最佳工艺为A3B1C3，极差R大小为C＞A＞B。以浸膏得率为指标，较好的方案为为A3B1C3。方差分析表明，以多糖含量及得膏率为指标，提取次数均有显著影响。结合实际角度考虑，拟将提取工艺定为：取枸杞、黄精粉末各半,混匀加5倍量95%乙醇浸泡30 min，加热回流1 h,过滤，残渣加5倍量80%乙醇回流1 h,过滤，残渣加水温浸3次，2h/次，水浴温度80℃，离心，合并上清液，浓缩。 2.2 验证试验称取药材按上述方法进行验证试验，结果浸膏得率为17.07%，多糖含量为36.48%。说明该工艺可行。 2.3 醇沉浓度的优选将上述优选工艺的二精丸提取物等分成3份，分别加入乙醇使含醇量分别达到60%，70%，80%，