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ING 4和FP 248基因检测在白血病和消化道肿瘤中的临床意义 学生 李继刚 导师 许文荣 江苏大学基础医学与医学技术学院 2008年06月06日 一 研究背景 1. ING 4基因 (1) ING 4基因的生物学特性及功能 （2） ING 4的变异与肿瘤发生的关系 (3) ING 4 在多种肿瘤组织中表达下调 2.原癌基因FP 248 二 研究内容和研究意义 3. 研究内容 三 方法建立 2.成功建立了采用Western 印迹技术检测ING 4蛋白质表达的方法； 3.成功建立了采用免疫组织化学技术检测组织中ING 4蛋白质表达的方法。 1.实验设计 2.研究结果 五、 ING 4和FP 248基因检测在白血  病中的表达及临床意义 2.研究结果 六、ING 4和FP 248基因表达检测在  消化道肿瘤中的临床意义 1.研究方案 2. 研究结果 表4.消化道肿瘤分期※及组织分化程度 表4.消化道肿瘤分期及组织分化程度 表7. 外周血单个核细胞中FP 248 mRNA阳性率与预后的关系 七.结论 ING4基因表达下调和FP248基因与胃癌等消化道肿瘤和白血病的发生发展可能存在相关性，检测这两个基因的表达有助于消化道肿瘤的诊断和预后。 采用nested RT-PCR检测外周血单个核细胞中FP248基因是筛选消化道肿瘤的好方法。 致谢 特别感谢许文荣教授的悉心指导！ 衷心感谢钱晖老师和朱伟老师的关心和帮助！ 感谢各位专家的百忙之中指导本人答辩！ 感谢我的同学和师弟师妹们的帮助和支持！ 发表文章 1. 李继刚， 许文荣， 钱 晖，朱 伟 ，王 胜，步雪峰，张 蕾 蕾，徐 静， 司煜安，陈 忠，周忠海，周洪兴，施晓凤. fp 248 mRNA在白血病和肿瘤中的诊断意义. 临床检验杂志， 2008 年第3期. 2.Jigang Li, Wenrong Xu, Hui Qian, Wei Zhu. Ing 4 as a novel diagno sis marker of tumor: the relationship between ing4 and leukaemia and solid tumor.（待发表）. 3. 徐 静，许文荣，钱 晖，朱 伟，李继刚，周洪兴, 周忠海，阴 晴，司煜安，张蕾蕾. 白血病细胞、多种肿瘤细胞及胃癌组织中 Pokemon基因的定量检测.临床检验杂志，2008, 26(1): 42-45. 骨髓和外周血 分离单个核细胞 抽提总RNA 逆转录并检测 ING 4 基因表达 检测FP 248 mRNA 分析临床意义 分析临床意义 抽提DNA 测序 测序 1.研究方案 注：I.部分骨髓及外周血标本中ING4基因扩增曲线 II：白血病患者骨髓中ING 4表达水平 1：健康对照； 2：缺铁性贫血患者骨髓；3：免疫性血小板减少患者骨髓；4：ALL患者骨髓；5：CLL患者骨髓； 6：CML患者骨髓；7：CML急性变患者骨髓；8：M2骨髓；9： MDS骨髓。III：白血患者外 周血ING 4 1：健康对照；2：M2； 3：AML；4：CML；5：ALL。IV： Western 印迹检测结果 A1：缺铁性贫血； A2：AML；B1：缺铁性贫血；B2：CML；C1：缺铁性贫血；C2：ALL。 图6. ING 4基因在白血病患者骨髓及外周血中的表达水平 I II III IV 注：A,B 和C. ING4基因cDNA测序部分图谱 框内部 分 为第四和第五外显子接头处易缺失序列。 A：AML, n=4; B：CML，n=5；C：ALL，n＝5。 A B C D 图7. ALL患者骨髓中ING4基因组DNA测序部分图谱 D. ALL患者骨髓中ING4基因组DNA测序部分图谱 框内 部分为第四和第五外显子接头处易缺失序列，左为基因组DNA第四外显子部