植物生产与生物技术.doc.DOCVIP

植物生產與生物技術 第一節植物組織培養之基礎 一、植物組織玲養之定義、基本原理、技街及目的 (一)植物組織培養之定義 由植物個體切取之組織、器官或細胞在人為控制之環境條件下,以無菌之 人工垮養基垮育至完整植物體之培育技術稱為禮物組織培養技銜。換言之, 即是以植物之任何部位當做培養材料(培植體),在人為設定之培養條件下 (如在一定之培養基、容器、溫度、光照...等)無菌培育之技術。 (二)禮物組織培養之基本原理 1.分化全能性 蒲公英之根及落地生根之葉片具有分化完整植物體之能力,吾人將這種由 植物體之某一部份發育成另lj種組織或器官並分化出種物體之現象稱為分化 (difTerentiatioI1),而將這種分化之能力稱為分化籠。有些細胞或組織可以分 化出植物體所擁有之所有器官者,我們將這種細胞或組織之分化能力稱為分 化全龍,而將這種性質稱為分化全能性(totipotency)。不僅可由植物體之根 或業分化出組織或器官,甚至也可由構成植物體之各個單一細胞分化出完整 植物體,像這種由植物細胞分化成完整植物體之實例非常多,如胡蘿蔔、菸 草、番茄、馬鈴薯、茄子...等o 2.逆分化與再分化 植物體是由不同構造與機能之各種組織所構成的。像這種具有特定機能之 植物組織狀態叫做分化。切取組織之一部份培養於適當之培養基上,則可誘 導出沒有一定形狀之細胞塊,將這種細胞塊稱為是傷組織(callus)。像這種 與正常分化方向呈相反方向之分化現象稱為逆分化(dedigerentiatioI1)。另一 方面,由癒傷組織也可分化出植物嫂,像這種經過逆分化之癒傷組織或細胞 再分化成植物體之現象稱為再分化(rediEeImtiatioI1)。利用組織細胞玲養技 術可以由胡蘿蔔、菸草、番茄等多種植物之癒傷組織或細胞分化出與自然胚 構造相同之胚禮,像這種白人工垮養所獲得之胚體稱為不定胚(adventitious embryos )。另,利用組織垮養育成之莖禁或芽體稱為不定芽(adventitious buds),同理分化出之根稱為不定根(adventitious roots)o 3.植物生長調節劑之利用 不定芽與不定板之分化,一般是以植物生長調節劑(piant growth regulator) 中之生長素(auxin)與細胞分裂素(cytokinin)之比例進行控制O當細胞分 裂素(C )/生長素(A)之量比(C/A比)高時分化出不定芽,反之,C/A 比之量比低時,貝1!分化出不定根,而C/A比之量比中等時,員1j誘導出癒傷組 織O 另一方面,不定胚之分化其最主要之方法是以生長素先誘導出癒傷組織, 再將長出之癒傷組織移入不今植物生長調節劑之垮養基中以分化出不定胚。 例如,胡蘿蔔等繳形花科(1jIIIbellifeme)植物均以這種方法分化出不定胚o 但中甘桔類植物之不定胚分化,則是以細胞分裂素先誘導出癒傷組織,再將長 出之癒傷組織移入不合植物生長調節劑之垮養基中之垮養方法為主來進行不 定胚之分化o 4.垮養目的與垮美材料 植物一般籍由以根、莖、黨等營養器官進行生長,而以花、果實等生殖器 官繁衍其子代來維持其物種之生存。組織垮養就是利用這些器官或器官之一 部份,甚至利用構成各個器官之組織或細胞做為垮養材料。這是因為植物有 分化全能性使然,也因此緣故,而開發出許多種之組織垮養方法及技術o 植物組織垮養隨培養目的之不同,其所使用之垮養材料也有所不同Q 例如, 欲大量繁殖出優良種苗庭、以基因之變異率低且再生能力強之莖頂分生組織做 為垮養材料,較易獲得優良種苗(表2.1)。而為獲得無病毒種苗則應以不今 病毒之莖頂分生組織做為材料o另垮養或生產單倍體植物或多倍體之之純 系植物,應以花粉或合花粉之花藥做為材料。叉,種問雜種或遠緣屬問雜種 植物之育種,應以合受精胚之子房、胚珠或胚做為材料來進行垮養。 表2,1培養目的與部位 |目的時許按計|垮養方法與技術|(毛培養部位于:11 |(1胸悶成!|莖頂培養、鄉村遁|頂芽肢芽! ()育種|@半倍體、純系之育出|花粉(1已藥)垮養|花藥、花粉門: @)近緣種問雜種之育出胚、胚珠、子房垮養,胚、胚珠、子房;2 試驗內垮養 @遠緣種問雜種之育出|原生質體培養、葉、幼苗、癒傷組織、 |細胞融合垮養細胞等 |@變異體之育出斗嘿|細胞(組織)培養|植物體之一部份it(:1 |@有用基因之導~Atii基因轉換、民小ii各組織、細胞、站立i ii|原生質體J斗位于| fffr人jaJKJji tEι半截心2吟呵!!恥芳、 (三)植物組織培養之技街及其利用 植物生物技術分野中,包括組織垮養、細胞培養、原生質體垮養、細胞融 合、基因工程等多種技術。其中,組織細胞培-養技術包括無菌播種、莖頂垮 養、器官玲養、花藥土吾養(含花粉垮養)、胚垮養、細胞垮養、原生