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第十章
细菌和病毒的遗传分析
张爱玲 2
内 容
细菌和病毒的特点
细菌的遗传分析
噬菌体的遗传分析
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第一节
细菌和病毒的特点
1.1 细菌的特点及培养技术
细菌特点
单细胞生物,不同细菌大小不一,1-2um长,0.5um宽
结构:鞭毛、荚膜、细胞壁、胞膜、胞质、DNA(称为拟核)
遗传物质:1个 主染色体、多个微小染色体
微小染色体:也称为质粒,携带不同的基因,使细菌具有不同的性状;被作为基因工程的载体
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细菌特点
繁殖世代短( 20分钟一个世代)
会发生突变:
菌落形态性状的突变:菌落的形状、颜色和大小等。
生理特性的突变:丧失合成某种营养物质能力的营养缺陷型(营养缺陷型)。
抗性突变包括:抗药性或抗感染性。
1.1 细菌的特点及培养技术
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1.1 细菌的特点及培养技术
细菌的培养技术
固体和液体培养:
液体培养后,细菌分裂呈几何级数增殖
吸取少量液体,无菌环境下,涂布在固体培养基上
细胞在固体培养基上不能移动,每个细胞会聚集成群,达107个细胞,肉眼可见(平板培养),称为无性繁殖/克隆
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1.1 细菌的特点及培养技术
细菌突变研究方法
1952年发明的影印培养法
过程:母板上长成菌落,然后拿一个比培养皿小的木板,上面包裹灭菌的丝绒,印在母板上,菌落会吸附在丝绒上,然后把丝绒印到不同成分的培养基上。
结果判断:凡是不能够在新的培养基上的菌落,为缺陷菌落。
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细菌的固体、稀释培养及菌落
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■ 合成代谢功能突变型:
营养缺陷型(auxotroph) 野生型(wild type)
缺陷型(deficient) 原养型(prototroph)
Met- 甲硫氨基酸缺陷型 Met+
Thi- 硫胺缺陷型 Thi+
Pur- 嘌呤缺陷型 Pur+
■ 分解代谢功能突变型:lac- 乳糖突变型,野生型为lac+
■ 抗性突变型:抗药性或抗感染性
StrR , StrS 分别表示对链霉素有抗性和敏感
T1R, T1S分别表示对T1噬菌体有抗性和敏感
R:resistant;S:sensitive
细菌的突变型和标识
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细菌的突变型和标识
基本培养基(minimal medium)
仅含葡萄糖和无机盐。
完全培养基(complete medium)
含细菌所必需的各种营养成分。
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1.2 病毒的生物学特征
比细菌结构更为简单,只有一条染色体(DNA或 RNA )。
病毒结构:蛋白质外壳+包被的核酸所组成的颗粒。
种类:根据宿主(动物、植物、细菌)或遗传物质(DNA或RNA)来分类。感染细菌的病毒(Bacterial phage),称为噬菌体(phage),是目前经过广泛研究,了解比较清楚的一种病毒。
在没有宿主情况下,可以视之为没有生命/或者一堆化合物
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1.2 病毒的生物学特征
病毒种类
依遗传物质划分:单链DNA,单链RNA,双链DNA,双链RNA
依与宿主细胞关系划分:如烈性噬菌体;温和噬菌体
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噬菌体
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1.3细菌和病毒在遗传研究中的优越性
繁殖世代周期短:min/h
易于操作管理和进行化学分析 (纯培养与代谢产物累积),节省空间和人力、物力;
便于研究基因的突变 (表现与选择);
便于研究基因作用 (突变型生长条件与基因作用);
便于研究基因重组 (重组群体大、选择方法简便有效);
遗传物质简单,可作为研究高等生物的简单模型
1.4 细菌和病毒的拟有性过程
细菌和病毒不同于真核生物配子融合的有性过程
遗传物质传递:从一个细胞传到另一个细胞
细菌的拟有性过程:转化、接合、性导、转导
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第二节
细菌的遗传分析
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1 细菌转化
转化: 细菌通过细胞膜摄取周围供体DNA的片段,并可能将外源DNA片段通过重组整合到自己染色体组的过程。
+
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1 细菌转化
转化: 细菌通过细胞膜摄取周围供体DNA的片段,并可能将外源DNA片段通过重组整合到自己染色体组的过程。
+
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1 细菌转化
外源DNA 要求:双链DNA(环状质粒);环状/线性
细菌要求:处于感受态状态,可能只发生在细菌生长周期的某一时期
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1 细菌转化
转化的类型
自然转化(natural transformation): 细菌能够自然地吸收DNA,如枯草杆菌的转化。
工程转化(engineered transformation)
通过某种处理使细菌能够摄入外源DNA,如大肠杆菌
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