污染肝素中多硫酸化硫酸软骨素的分步醋酸纤维素薄膜电泳分析论文.docVIP

　　污染肝素中多硫酸化硫酸软骨素的分步醋酸纤维素薄膜电泳分析论文 王皓 于广利 赵峡 郝翠 胡艳南 殷秀红 【摘要】 采用离子交换色谱法从污染肝素原料中分离出多硫酸化硫酸软骨素(OSCS)，建立了分步醋酸纤维素薄膜电泳法分析污染肝素中OSCS含量的方法。结果表明，先以0.05 mol/L醋酸钡缓冲液(pH 5.0)电泳，再以0.15 mol/L醋酸锌缓冲液(pH 6.3)电泳，可以将肝素和OSCS完全分开，检出限为0.1 g/L; 通过灰度积分建立定量校准曲线，相关系数为0.9934，平均回收率为102.1%～106.1%; RSD为4.1%～6.0%。 【关键词】 肝素.freelinated heparin，CHP)中分离得到OSCS，并通过1HNMR确证了其结构。在分析比较了不同缓冲液体系中OSCS醋酸纤维素薄膜电泳行为的基础上，建立了醋酸钡醋酸锌分步电泳法。本方法可将OSCS与HP和其它糖胺聚糖有效分离，并可对OSCS进行定量分析，达到了快速检测HP中杂质的目的。 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 AKTA FPLC快速蛋白纯化系统(美国GE公司);Elx 808酶标仪(美国BioTek公司);3000 xi电泳仪(美国BioRad公司);DYCP38B卧式水平电泳槽及凝胶采集系统(美国SIM公司);GelPro Analyzer软件(美国Media