芦竹热解醋液对短裸甲藻地抑制作用研究.pdfVIP

万方数据 谨以此论文献给所有关心和帮助我的人们 万方数据 万方数据 万方数据 芦竹热解醋液对短裸甲藻的抑制作用研究 摘 要 据 2013 年中国海洋环境状况公报显示，我国近岸约 6.5 万平方公里的海域 呈重度富营养化状态，海洋赤潮灾害多发，海洋环境突发事件风险加剧。全海域 共发生赤潮 46 次，累计面积 4070 平方公里。赤潮作为全球性的海洋灾害，给渔 业养殖、海洋生态和大众健康造成的危害日趋严重。而现有赤潮治理办法不能安 全经济有效的控制赤潮，因此，开发一种安全环保的除藻剂依然是海洋生态治理 的难题和关键。同时，我国湿地面积广阔，水生植物储量巨大，芦竹作为水生常 2 见植物在我国有效种植面积超过 20 万 hm ，总产量超过 1000 万吨。而目前生物 质收割后不仅没有妥善处理和利用甚至造成资源浪费和二次污染，实际上这些生 物质开发利用潜力巨大。生物质转化利用技术中热解液化技术备受关注，其液相 产物中的轻质组分（热解醋液）常做为副产品收集，而实际上生物质醋液具有很 高的生物活性，能够抑制某些植物及有害微生物的生长。 因此本文以湿地常见水生植物芦竹为生物质原料，分别将其在 300、400、 500、600℃下进行热解，通过自制冷凝装置收集醋液，比较不同醋液的理化性质 并明确醋液的化学组分。同时研究各醋液对短裸甲藻细胞生长和运动能力的抑制 作用，并从氧化损伤的角度进一步探究对藻细胞抑制的机理，以期为水生植物的 高价值利用和赤潮治理提供新的解决思路。 本文对比研究了芦竹四种不同温度热解醋液的理化性质并通过 GC-MS 分析 醋液中的化学组分，结果显示，各温度醋液含水量 60%以上，化学组分差异不明 显，均含有 30 种以上化学物质，其中 40%以上是乙酸，其次含量较高的物质有 2,6-二甲氧基苯酚、糠醛（呋喃甲醛）、邻甲氧基苯酚（愈创木酚）、2,3-二氢苯 并呋喃、5-羟甲基糠醛。不同温度醋液对藻细胞的抑制作用不同，72h 半效应浓 度（EC ）值分别为0.65、1.09、1.04、1.08ml/L，其中 300℃醋液抑制效果最 50 好。通过对藻细胞运动能力的影响发现醋液可显著抑制藻细胞的鞭毛，使其丧失 运动机能，部分处理组一段时间后可恢复，而部分无法恢复运动能力。透射电镜 （transmission electron microscope, TEM）观察藻细胞经300℃醋液处理的 亚显微结构发现，醋液中的活性分子穿透细胞壁，先附着在磷脂双分子层，流动 性增强进入细胞后损伤细胞质。小液泡包裹外源物质溶进大液泡导致液泡明显增 万方数据 多变大，并挤压其他细胞器，细胞质基质降解出现空腔，色素体数量减少，叶绿 体内嵴局部降解，外源醋液活性分子还可进入细胞核内，损伤核内物质导致降解 出现空腔。300℃醋液可诱导藻细胞叶绿素 a 的含量下降，细胞内MDA 的积累说 明发生脂质过氧化反应。在醋液作用下，细胞内总活性氧（ROS）的含量和超氧 阴离子自由基（O – ·）、过氧化氢（H O ）、和羟自由基（OH•）的含量随着醋液浓 2 2 2 度增加而逐渐增大。抗氧化系统酶中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD） 和过氧化氢酶（CAT）为清除自由基应激产生，在一定浓度范围内一直保持升高 趋势，当活性氧异常增多超过一定阈值，抗氧化酶活性也急速下降，此时藻细胞 已受损死亡。在一定醋液浓度范围内，可诱导短裸甲藻离体叶绿体产生活性氧， 而高浓度醋液作用下，叶绿体损伤，还可导致线粒体去极化，这与细胞内 72h 时 ROS 的变化相一致。通过加入电子传递链抑制剂的方式研究了醋液诱导藻细胞产