微生物检验 第六章 的G-球菌.ppt

第七章 革兰阴性球菌 1.形态染色 革兰阴性双球菌 直径0.6~1.5μm 形似双肾或咖啡豆样， 凹面相对 无动力，无芽胞， 某些菌种形成荚膜 2．培养特性 需在培养基中添加羊血、兔血或血清。 需氧生长，初次分离需5~7%CO2和高湿度。 最适生长温度为35~37℃，低于30℃不生长，血琼脂平板或巧克力琼脂平板上呈光滑、湿润、透明或半透明、直径1~2mm的不溶血、圆形、灰兰色菌落。 3．生化特性 氧化酶阳性，触酶阳性（除延长奈瑟菌外）。 对糖分解能力、硝酸盐还原能力和DNA合成酶不同，常作为菌种间的鉴别依据。 4．抵抗力 对寒冷、干燥和热的抵抗力弱，对化学消毒剂敏感。 对青霉素敏感 但近年来由质粒介导的β内酰胺酶所致的耐药在淋病奈瑟菌中产生较多。 标本采集 无菌方法抽取脑脊液、关节液、血液、瘀点穿刺液等标本。 采集后立即送往实验室。 用血平板进行床边接种后置35℃孵育。 血液标本接种在血液培养瓶中置35℃孵育。 标本运送时需要35℃保温。 标本直接检查 直接涂片检查 脑脊液直接或经离心后取沉淀涂片。 皮肤瘀点渗出液涂片。 革兰染色后显微镜下见白细胞内外的革兰阴性双球菌，可报告“检出革兰阴性双球菌，疑似脑膜炎奈瑟菌”。有助于流行性脑脊髓膜炎早期诊断。 分离培养鉴定 脑脊液标本：接种在巧克力琼脂或羊血琼脂平板。 咽拭子或鼻咽拭子：接种在选择性培养基上如改良的MTM、NCY等培养基。 血液标本：经增菌培养基增菌培养后，移种至巧克力琼脂或羊血琼脂平板上。 置5~7%CO2 35℃孵育，每隔24h观察平板。 鉴定 初步确定为奈瑟菌属 直径1~2mm，灰褐色、光滑、半透明、稍扁的菌落 涂片革兰染色见阴性双球菌 氧化酶试验阳性 葡萄糖和麦芽糖发酵试验阳性、其他糖类发酵阴性。 用分型血清确定血清型别。 平板上没有发现菌落需继续观察72h后无菌生长可报告为阴性。 1．检验程序 2．标本采集 阴道和宫颈分泌物：用无菌塑料棒涤纶拭子，伸入阴道后穹隆或宫颈内1cm处 停留10~15秒时间，蘸取。 采集尿道分泌物：弃去前段脓性分泌物，留取后段作为标本。 新生儿结膜炎时应采取眼结膜表面分泌物。 3．标本直接检查 标本采集后涂片、革兰染色、显微镜检查 4．分离培养与鉴定 选择培养基如MTM，Martin-Lewis（ML），或NYC。 置于5%CO2气体条件下35~37℃孵育。 每隔24h观察平板。 （1）形态和生化鉴定 可疑菌落 直径0.5~1mm，灰褐色、光滑、半透明呈露滴状凸起的菌落。 确认 将菌落涂片，革兰染色见革兰阴性双球菌 氧化酶和触酶试验阳性 葡萄糖发酵试验阳性，其它糖类阴性 培养需观察72h后无菌生长可报告为阴性。 （2）免疫学鉴定 直接荧光染色。 凝集试验或免疫渗滤技术。 第二节 卡他莫拉菌 卡他莫拉菌（M.catarrhalis） 可存在于健康人群的上呼吸道 近十年来报道 导致中耳炎、鼻窦炎、慢性阻塞性肺炎 在免疫抑制和ICU的患者可导致菌血症 是社区呼吸道感染的主要病原体之一。 临床分离 从中耳炎或鼻窦炎患者穿刺抽取标本 呼吸道感染患者应采取合格痰标本或支气管灌洗液 口咽部位存在卡他莫拉菌可污染痰液标本 痰液标本直接涂片革兰染色 如出现多个中性粒细胞、柱状上皮细胞以及大量的直径为0.5~1.5μm革兰阴性双球菌可怀疑卡他莫拉菌感染。 培养及鉴定 在血液琼脂或巧克力琼脂平板上生长良好 35℃24h孵育后菌落直径1~3mm，灰白色、光滑，用接种环推菌落可将整个菌落在平板表面移动。 氧化酶和触酶阳性。 不发酵葡萄糖和其它糖类产酸。 大多数菌株还原硝酸盐和产生DNase。 三丁酸甘油酯水解（丁酸酯酶）试验阳性可与奈瑟菌属鉴别。 可产生诱导型β内酰胺酶 。 奈瑟菌属和卡他布兰汉菌的鉴定 复习思考题及作业题 临床送检标本如怀疑葡萄球菌属细菌感染，应怎样处理标本并最终发出结果报告？ 临床送检标本如怀疑淋球菌，应怎样处理标本并最终发出结果报告？ * Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 第一节 奈瑟菌属 革兰阴性双球菌，无鞭毛，无芽胞，有菌毛 对人致病：淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌 N. meningococcus Neisseria gonococcus Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 脑膜炎奈瑟菌临床意义 致病物质 脂多