不同提取路线合欢皮皂苷对荷瘤小鼠毒性研究.PDFVIP

不同提取路线合欢皮皂苷对荷瘤小鼠的毒性研究 杜芳芳，陈丽敏，刘玲艳，高越颖，冯磊，邱丽颖* ，金坚(江南大学医药学院，江苏 无锡 214122) 摘要：目的 研究不同提取路线提取的合欢皮皂苷对荷瘤小鼠的毒性影响。方法 取H22 肝癌细胞腹腔内接种7 d 的小 鼠腹水，无菌条件下于小鼠的右腋下接种制备小鼠实体瘤模型。实验分为对照组、模型组、3 条不同路线提取的皂苷组(分 别记为组分1、组分2 、组分3 ，5 mg·kg1 1 ·d ) 。连续观察10 d，记录小鼠体重、饮食变化、小鼠存活率，并计算其器官 指数。结果 与模型组相比，皂苷组的小鼠均出现了不同程度的毒性表现，体重和饮食量呈现一定的下降趋势；组分1、 组分2 、组分3 的存活率分别为75% ，50% ，62.5% ；组分1 对各器官指数无明显差异，组分2 明显增加小鼠的肝、脑器 官指数，组分3 的皂苷明显增加小鼠的脑器官指数。结论 3 条不同路线提取的皂苷对荷瘤小鼠毒性不同，以组分 2 毒 性最大。 关键词：合欢皮皂苷；提取工艺；毒性；肿瘤 中图分类号：R965.2 文献标志码：A 文章编号：1007-7693(2011)13-1308-04 合欢皮(Albizia Cortex) 为合欢树皮(Albizia 1 材料与方法 julibrissin Durazz) ，具有解郁安神、活血消肿的功 1.1 提取材料 能，用于心神不安、忧郁失眠、肺痈疮肿等症。合 合欢皮(无锡山禾药业集团，批号：090401)， 欢皮中含有三萜、黄酮、木脂素、生物碱、鞣质及 由南京中医药大学陈健伟教授鉴定为合欢Albizia 多糖等多种化学成分[1] 。研究表明，合欢皮具有镇 julibrissin Durazz 的干燥树皮，产地：浙江；乙醇、 静、抗生育、抗菌、抗癌等作用[2]，但大多是对其 氯仿、正丁醇均为市售分析纯。 体外细胞毒作用的研究。笔者前期工作发现，合欢 1.2 分离提取路线 皮提取物具有显著抗肿瘤新生血管的作用[3-7] ，但 70% 乙醇加热提取 2 次，提取液浓缩至无乙 对正常鼠也存在一定的毒副作用[8-9] ，但对肿瘤鼠 醇。通过D101 型大孔树脂柱吸附后依次用水、35% 的毒性表现的报道较少。为此，本试验对不同工 和 80%乙醇进行梯度洗脱，收集 80%洗脱组分， [10] 艺路线提取合欢皮的总皂苷对 H22 荷瘤小鼠的毒 冷冻干燥 。 性进行了研究。 将所得的冻干粉500 mg 溶于50 mL 的水中， 作者简介：杜芳芳，女 Tel: E-mail: jndxdff@126.com *通信作者：邱丽颖，女，博士，教授 Tel: E-mail: qly325@126.com ·1308 · Chin JMAP, 2011 May, Vol.28 No.13 中国现代应用药学2011 年5 月第28 卷第13 期 分别按照 3 条不同的分离提取路线提取冻干粉中 标，绘制标准曲线，计算回归方程。合欢皮皂苷 的皂苷，收集各个组分以及最后的水相，冷冻干 也用上述方法测其吸光度，由回归方程计算其齐 燥后即为本实验所用的初始样品。 墩果酸的相当量(mg) ，再折算成合欢皮皂苷的质 提取过程中各物质均与提取液按1 ∶1 的体积 量。合欢皮含量计算公式为：合欢皮的含量(%)= 量进行提取。 合欢皮的质量(mg)/冻干粉的质量(mg) 。 路线 1：先将用上述冻干粉制备的溶液的pH 1.5 试验动物及给药方法 调制成碱性，并用氯仿多次萃取生物碱。然后调 1.5.1 试验动物 小鼠H22 肝癌瘤株购自上海医 成酸性，用氯仿多次萃取黄酮。再将溶液调成中 药工业研究院药理