激发光谱与荧光光谱.ppt

荧 光 光 度 计;掌握分子荧光产生的过程及其影响因素 熟悉荧光光度计的基本构件及操作程序 了解荧光分析法的特点与应用 ;【实验原理】;1. 分子能级与跃迁 分子能级比原子能级复杂； 在每个电子能级上，都存在振动、转动能级； 基态(S0)→激发态(S1、S2、激发态振动能级)：吸收特定 频率的辐射；量子化；跃迁一次到位； 激发态→基态：多种途径和方式(见能级图)；速度最快、激发态寿命最短的途径占优势； 第一、第二、…电子激发单重态 S1 、S2… ； 第一、第二、…电子激发三重态 T1 、 T2 … ；;2.电子激发态的多重度; （S0：单线基态；S1：最低激发单线态；T1：最低激发三线态；A： 吸收；F： 荧光；P：磷光；v：振动驰豫；ISC：系间窜跃） ;3.激发态→基态的能量传递途径;二、激发光谱与荧光光谱;2.荧光光谱(或磷光光谱);3.激发光谱与发射光谱的关系;镜像规则的解释;200;三、荧光的产生与分子结构的关系;2.化合物的结构与荧光;;四、影响荧光强度的因素;4.内滤光作用和自吸现象;5.溶液荧光的猝灭;二、仪器结构流程;仪器光路图;同步扫描技术;可获得三维光谱图的仪器;日立F-4500荧光仪;开机顺序： 开机前首先确认主机两个开关：POWER/MAIN均处于关闭状态（搬向O处）。 先接通电源开关（POWER）， 5秒钟后再按下氙灯点灯按钮，当氙灯点燃后，再接通主开关（MAIN）。此时主开关上方绿色指示灯连续闪动三下。 接通电脑及打印机电源，Win98开始建立，随后F-4500操作界面自动进入。 按界面提示选择操作方式。 关机顺序： 逆开机顺序实施操作。 当电源开关关闭后5秒钟，再次接通10分钟。（目的是仅让风扇工作，使灯室散热）最后关闭电源开关。;三、荧光分析方法与应用;2.定量依据与方法;（2）定量方法;3.荧光分析法的应用;;;测 试 题;