第三章可移动的遗传因子转座和染色体外遗传因子.pptVIP

质粒（plasmid） 三、特殊细菌质粒（了解） （一）F 质粒 ——性质粒 F 质粒是一种环状的DNA分子，分子量94.5kb； F 质粒有整合进入细胞染色体而产生Hfr细胞 的能力； 染色体上有20多个整合位点，F质粒对其亲和力 不同，形成Hfr 细胞株的频率也是不同的； F 质粒的整合方向可以是顺时针，也可逆时针； F 质粒可从一个细胞转移到另一无F 质粒的细胞。 （二）R 质粒——耐药性质粒 R 质粒由抗性转移因子（RTF）和决定抗性 因子（r-决定子）两部分DNA片段组成。 （三）Col 质粒——大肠杆菌质粒 是能产生大肠杆菌素的大肠杆菌质粒，可以 抑制或杀死不含Col 质粒的亲缘细菌。 R 质粒含有对抗生素的抗性基因，使宿主细 菌产生对抗生素的抗性，这种耐药性是可以 遗传的。 在减数分裂时，通过同源染色体的交换和非同源染色体的独立分配，使子代细胞的遗传信息产生了重新组合，这种现象称为遗传重组。（genetic recombination） 第三节 遗传重组 遗传重组定义： 广义的遗传重组：指任何产生新的基因组合，从而造成基因型变化的过程，包括独立分配或基因交换。 狭义的遗传重组：仅涉及DNA分子的断裂并重 新连接而造成基因重新组合的过程，即基因交换。 遗传重组类型 1.同源重组 2.位点特异性重组 3.转座作用 4.异常重组 依据对DNA序列和所需蛋白质因子的要求 一、同源重组 （homologous recombination） 发生在同源序列间的重组称为同源重组，又称基本重组。是最基本的DNA重组方式。 通过链的断裂和再连接，在两个DNA分子大片同源序列间进行单链或双链片段的交换。 1、同源重组的产生： 产生条件：只要两条DNA序列相同或相似，就可 以在序列的任何一点发生同源重组。 二、同源重组的分子机制 ① 两个DNA分子单链的同一部位发生断裂。 ② 两个断裂的单链的游离末端彼此交换，连接形成Holliday连接体。 ③ 通过分支移动产生同另一分子的互补序列形成异源双链DNA。 ④ Holliday交叉的上部或下部旋转1800，中间体 切开并修复，形成两个双链重组体DNA，分别为： 片段重组体和拼接重组体。 普遍公认的是1964年提出的Holliday模型，该模型于1975年得到改进： 片段重组体—— 基本无重组发生： 拼接重组体——交换重组： 切开的链与原来断裂的是同一条链，重组体含有一段异源双链区，其两侧来自同一亲本DNA。 切开的链并非原来断裂的链，重组体 异源双链区的两侧来自不同亲本DNA。 片段重组体 拼接重组体 RecBCD核酸酶 RecA蛋白 RuvAB和RuvC蛋白 （三）、同源重组的酶学 对大肠杆菌的研究最为深入，主要蛋白质有： 1、RecBCD蛋白 RecBCD是一种多功能酶，具有外切核酸酶、解 螺旋酶、ATP酶和序列特异的单链内切酶活性。 单链内切酶活性和解旋酶活性使DNA产生具有游离末端的单链－－－RecA的作用位点 RecBCD有固定切割位点 单链区的 chi 位点3′方4～6NT处切断单链(单链内切酶) chi位点：5′-GCTGGTGG-3′目前发现的重组热点，E.coli基因组中大约每10Kb出现一个该位点. 5′ 3′ RecBCD 切割产生3’单链末端 chi位点：5′-GCTGGTGG-3′ 2、RecA 蛋白 活性 RecA 有单、双链 DNA 结合活性 RecA 有 ATPase 活性 RecA 有启动一个分子的单链侵入到另一双螺旋分 子的能力，即联会同源 DNA 功能： 在ATP的协助下， 促进各种DNA分子进行同源配对或分子入侵，形成同源配对的联合分子。 RecA 蛋白催化双链和单链 DNA 的反应阶段 * 第三章 可移动的遗传因子（转座子） 和染色体外遗传因子 生化教研室 林丽彬 主要内容 第一节 转 座 子 第二节 质 粒 第三节 遗传重组 第一节 转 座 子 转座子(transposons) 概念： 转座子是基因组突变的主要因素之一。 转座子（transponsn,简称Tn）是原核生物和真核 生物基因组中存在着可从一个染色体位点转移到另一位点的一些DNA序列。这些DNA序列可以通过切割、重新整合等一系列过程从基因组的一个位置“跳跃”到另一个位置。故又称跳跃基因。