常见免疫方法分析及三项—培训课件.ppt

第五节 梅毒螺旋体 又称苍白密螺旋体——梅毒的病原体（STD之一） 生物学性状 菌体细长，两端尖直，8-14个螺旋，镀银染色呈褐色，运动活泼（暗视野） 人工培氧不成功 抵抗力极弱（温度、干燥），抗生素敏感 先天性梅毒 流产、死胎 梅毒儿（皮肤病变、锯齿形牙、角膜炎、先天耳聋） 后天性梅毒分三期（潜伏期3W） 一期梅毒：外生殖器无痛性硬下疳（丘疹—硬结—溃疡），病灶及渗出物中大量螺旋体—传染性级强 二期梅毒：全身皮肤、黏膜梅毒疹，周身淋巴结肿大（内有大量螺旋体），传染性强 三期梅毒（晚期梅毒）：皮肤黏膜溃疡性坏死，侵犯内脏（心血管、神经系统），病灶中无螺旋体，传染性小，破坏性大 梅毒疹 梅毒的免疫性 感染梅毒后，首先产生IgM型抗梅毒螺旋体抗体，感染2周后即可测出，早期梅毒抗梅治疗3～9个月后或晚期梅毒治疗2年后，大部分病人IgM可转阴性，再感染时又出现阳性，故IgM型抗体的存在是活动性梅毒的表现 另一种具有抗体性质的物质叫反应素（reagin），是梅毒螺旋体破坏人体组织过程中释放出的一种抗原性心磷脂刺激机体所产生的抗体。反应素一般在感染后5～7周（或下疳出现后2～3周）产生经正规治疗后可逐渐消失。 感染梅毒四周左右产生IgG型抗梅毒螺旋体抗体，即使经足量抗梅治疗，梅毒螺旋体抗原消失后很长时间，IgG抗体仍可通过记忆细胞的作用继续产生，甚至终生在血清中可测出 梅毒检测技术 梅毒的病原学检测 非特异性梅毒血清学试验 特异性梅毒血清学试验 暗视野显微镜检查法：目前国内主要的梅毒病原学诊断方法。是最特异的一期梅毒检测方法。取材部位以硬下疳为主，亦可从宫颈、阴道、淋巴结等处取材。阳性可确诊，阴性不能排除梅毒（阴性结果须在不同的3天采样检测才能做出）。暗视野显微镜法诊断的准确性受操作者的经验、病灶中活螺旋体的数量及口腔、肛门破损处存在的非致病性螺旋体等因素影响 镀银染色法：与暗视野检查法的临床意义基本相同。利用梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染成棕黑色，再通过普通高倍显微镜进行观察 直接免疫荧光法（DFA)：是目前国外采用较多的方法，其特异性及敏感性均优于暗视野检查法。将特异性的抗梅毒螺旋体单克隆抗体用荧光素标记，如标本中存在梅毒螺旋体，则通过抗原抗体特异性结合，在荧光显微镜下可见到发苹果绿色的梅毒螺旋体 梅毒的病原学检测 非梅毒螺旋体抗原血清试验：是以心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原检查血清中的反应素，用于初筛试验及疗效观察。可以分为以下四种试验，原理基本相同： 1、性病研究实验室玻片试验（VDRL) ：由于试剂需现配 现用，故而国内实验室很少采用。但VDRL是诊断神经性梅毒在最特异的血清学方法 2、快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)：在特制的纸片 上进行，加入一定量特制的炭粉，可使抗原抗体出现 凝集，用肉眼可观察结果。 3、甲苯胺红试验（TRUST)：在试剂中加入甲苯胺红代替炭粉 颗粒，使结果更易于观察。 4、不加热血清反应素试验（USR) 非特异性梅毒血清学试验 非梅毒螺旋体抗原血清试验的缺陷 1、特异性：由于在多种疾病，如急性病毒性感染、自身免疫性疾病、结缔组织病、静脉吸毒者以及怀孕妇女中均可出现反应素，所以此类试验有时会出现假阳性反应 2、敏感性：非梅毒螺旋体抗原血清试验有时出现弱阳性或阴性结果，而临床上又像二期梅毒，此时应将此血清稀释后做定量试验，如出现阳性结果，则为抗体过量引起的前带现象。1~2％的二期梅毒病人可出现此现象而发生梅毒假阴性反应。此外，由于感染梅毒后反应素的出现时间晚于特异性梅毒螺旋体抗体，晚期梅毒反应素又可能转阴，再加上这类试验对隐性梅毒也不敏感，因此用此类试验进行梅毒筛查时，存在着相当数量的漏检 非梅毒螺旋体抗原血清试验的优点 1、非梅毒螺旋体抗原血清试验阳性的患者往往是梅毒现症感染者，临床上即可开展治疗 2、非梅毒螺旋体抗原血清试验表现为滴度随成功的治疗而逐渐下降，故可以作为疗效观察的指标 3、此类方法价格低廉 非特异性梅毒血清学试验（一） 用定量非梅毒螺旋体抗原血清试验进行疗效观察 1、治疗成功：早期梅毒患者在治疗后6个月内症状消失且非梅毒螺旋体抗原血清试验滴度有至少4倍的下降。晚期梅毒或隐性梅毒患者在治疗后12~24个月内非梅毒螺旋体抗原血清试验滴度有至少4倍的下降 2、治疗失败：治疗后症状持续或重新出现；治疗后非梅毒螺旋体抗原血清试验滴度反而上升了4倍或以上；非梅毒螺旋体抗原血清试验初始滴度较高（1:32或以上）但在六个月内没有达到4倍的下降。抗梅毒治疗失败的病人应考虑合并HIV感染及神经梅毒的可能性 3、血清固定：经正规治疗后，梅毒患者非梅毒螺旋体抗原血清试验