核酸的化学优质课.pptVIP

3、DNA变性的特征 变性核酸将失去其部分或全部的生物活性。 变性改变了DNA的二级结构。核酸的变性并不涉及磷酸二酯键的断裂，所以它的一级结构(碱基顺序)保持不变。 DNA的变性过程是突变性的，它在很窄的温度区间内完成。 DNA解链温度 紫外吸收值明显增加，即增色效应。 粘度降低，沉降系数增加。 第二章第四节核酸的化学 DNA解链温度（熔点， Tm ） 当50% 的DNA变性时的温度称为该DNA的解链温度，即增色效应达到一半时的温度；一般DNA的Tm值在70-85?C之间。 均一DNA（如病毒）的Tm值范围较小。 分子中G和C的含量越高，越不易变性，Tm值越高。可通过经验公式计算：（G+C)%=(Tm-69.3)X2.44 Tm值随溶液盐浓度增加而增大， Tm值较低，易变性，不易保存。 第二章第四节核酸的化学 溶解曲线与Tm。 。 第二章第四节核酸的化学 增色效应与减色效应 天然DNA分子在热变性条件下，双螺旋结构破坏，碱基暴露，在紫外光260nm波长处的吸收度明显增加，此现象称为增色效应。 变性DNA分子复性形成双螺旋结构时其紫外吸收降低的现象称为减色效应。。 第二章第四节核酸的化学 第二章第四节核酸的化学 七、DNA的复性 概念 复性的条件 分子杂交 第二章第四节核酸的化学 1、复性的概念 变性DNA在适当的条件下，两条彼此分开的单链可以重新缔合成为双螺旋结构，其物理性质和