第四章凝胶排阻20130321.pptVIP

第四章 凝胶（排阻）层析 中国医科大学实验技术中心 孙晋民 排阻层析(exclusion chromatography)，亦称分子筛层析(molecular sieve chromatography)、凝胶过滤(gelfiltration)。凡是利用生物大分子的相对分子质量(relativemolecular mass，Mr)差异进行层析分离的方法，均称之为排阻层析。用于排阻层析的分离介质称为排阻层析介质。在20世纪60年代初就开始使用凝胶介质分离生物大分子。例如，用淀粉或者琼脂糖作为电泳支持物分离血清中的蛋白质，凝胶在其中起分子筛作用。后来人们将凝胶制成球形微珠，作为液相层析分离介质，用于分离生物大分子，并获得巨大成功。现在使用的凝胶层析介质的用途远远超出了电泳分离介质的范畴，已成为分离纯化生物大分子最重要的分离介质之一，也是作为合成带有配基的层析介质应用最广泛的一种载体。凝胶层析介质主要是以葡聚糖、琼脂糖、聚丙烯酰胺等为原料，通过特殊工艺合成的层析介质。目前已成为生物化学、分子生物学和生物制药在研究和生产中必不可少的分离介质。 第二节 凝胶层析原理 一、基本原理 凝胶类层析介质是一种在球体内部具有大孔网状结构凝胶微粒，不同大小的网状孔径像筛子一样，可以把大小不同的生物大分子按一定的顺