细胞破碎王小建.pptVIP

前 言 细胞破碎是了解细胞组成和结构,获得细胞内含物的必要手段。 胞内的生物活性物质的稳定性差,条件不适极易失活。特别是微生物细胞十分微小,细胞壁结构比较紧密,一般方法不易将细胞打破,有些技术虽然可以,但条件严苛,胞内生物活性物质在此条件下很易失活,限制了一些技术应用。 在一定程度上细胞破碎仍是生物技术产业化关键技术。 2、细胞壁结构和组成 微生物细胞外膜使细胞具有刚性的外形,由胞质膜和细胞壁组成,其结构影响着细胞破碎。 胞质膜保持着细胞内外的物质浓度梯度,主要由蛋白质和脂类组成。没有细胞壁时,膜对渗透休克敏感,对其它破碎方法影响较小。 细胞壁是破碎的主要障碍,其组成和结构对细胞破碎有重要影响。细胞壁的组成和结构与遗传和环境因素有关,但在微生物的种属中也存在总结构上的相似性。 2、细胞壁结构和组成 1964年Salton首次利用机械破碎法破碎细菌细胞，对细菌细胞壁组成、结构和功能进行研究。尤其对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁结构有了较为全面认识。 除了菌质和一些L-型和嗜盐菌以外，几乎所有的细菌的壁的较坚硬部分都是由短肽交联的糖原链，即粘肽构成，围绕着细胞形成连续的网状结构，使细胞具有一定的形状和强度。 * 4. S-200凝胶层析 将包涵体溶液进行Sephacryl S-200柱层析（Φ10cm?120cm，粒径25-75μm）室温洗脱