备战201413版生物专题辅导与训练配套课件江苏专用91基因工程.ppt

（4）由题意可知，目的菌株是将絮凝性细菌和石油降解菌融合后建立的，因此该菌株既能分泌具有絮凝活性的化合物，又能在含有石油的培养基上生长。 （5）该实验的目的是探究目的菌株不同发酵时间发酵液的絮凝效果，故需要设置不加发酵液的石油污水作对照，从而确定目的菌株的絮凝效果。 满分答案：（1）分解细胞壁 （2）诱导原生质体融合 （3）两亲本失活部位不同，融合后活性部位互补 （4）石油 （5）不加发酵液的石油污水 1.（2012·浙江高考）天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是（ ） A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B B.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花的矮牵牛的基因文库中获取基因B C.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞 D.将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞 【解析】选A。具体分析如下： 2.在高光强、高温和高氧分压的条件下，高粱由于含有磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶，其利用CO2的能力远远高于水稻。从高粱的基因组中分离出磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因（Ppc基因），利用农杆菌介导的转化系统将其转入水稻体内，从而提高水稻的光合效率。下列说法错误的是（ ） 第1讲 基因工程 一、基因工程 1.基因工程的三种基本工具 （1）三种工具的比较： （2）限制酶切割时的注意事项： ①注意切割的序列是否会连接成环：切割图1中的目的基因时，最好不要只用BamHⅠ，因为只用BamHⅠ切割时，目的基因的两端具有相同的黏性末端，易自行连接成环，因此最好同时用BamHⅠ和Hind Ⅲ切割。 ②限制酶的切割序列具有包含关系：图2中BamHⅠ和MboⅠ识别的碱基序列和酶切位点分别是G↓GATCC、↓GATC，这两个限制酶都可切割同一碱基序列GGATCC。 ③切割时注意是否破坏所有抗性基因，导致缺乏标记基因。 2.基因工程的基本操作程序 （1）目的基因的获取途径： （2）基因表达载体的构建——重组质粒的构建： ①表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因+复制原点。 ②启动子和终止子：启动子是RNA聚合酶结合位点，启动转录；终止子是终止转录的位点。 ③基因表达载体的构建过程： （3）将目的基因导入受体细胞——转化： ①导入方法因受体细胞的种类不同而异： ②转化的实质：目的基因导入受体细胞染色体基因组中并表达和发挥作用。 （4）目的基因的检测与鉴定： ①导入检测：DNA分子杂交技术（使用DNA探针）。 ③个体生物学水平鉴定：如对转基因作物进行抗虫或抗病等的接种实验。 【热点考向1】 基因工程的基本工具 高考频次3年18考 预测指数☆☆☆☆☆ 【典题训练1】（2010·江苏高考）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题： （1）图1所示的一个质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有_____个游离的磷酸基团。 （2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越_____。 （3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是_______。 （4）与只使用EcoR Ⅰ相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止______。 （5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入______酶。 （6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了__________。 （7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体中，然后在____的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。 【规范答题】（1）生物术语要规范，用词要准确。 （2）分析图示要到位，注意限制酶的作用位点的差异。 （3）解答最后一题时要明确选择培养基在基因工程中的作用。 【解析】本题考查基因工程中的限制酶的作用特点。 （1）质粒切割前是双链环状DNA分子，所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键，故不含游离的磷酸基团。从图1可以看出，质粒上只含有一个SmaⅠ的切点，因此被该酶切割后，质粒变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团。 （2）由题目可知，SmaⅠ识别的DNA序列只有G和C，而G和C之间可以形成三个氢键，A和T之间只可以形成两个氢键，所以SmaⅠ酶切位点越多，热稳定性就越高。 （3）质粒上抗生素抗性基因为标记基因，由图2可知，标记基因和外源DNA目的基因中均含有SmaⅠ酶切位点，都可以被SmaⅠ破坏，故不能使用该酶剪切质粒和外源DNA。 （4）只使用EcoRⅠ，