小鼠腹腔吞噬细胞的吞噬实验2008.pptVIP

小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验 目的要求 实验原理 实验用品 方法与步骤 实验结果 实验报告 目的要求 1．了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2．熟悉细胞吞噬作用的基本过程 3．了解细胞吞噬实验的研究意义 基本原理 吞噬是单细胞动物摄取营养物质的主要方式，也是高等动物的一种非特异性免疫防护机制。高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能，当病原微生物或其他异物侵入机体时，巨噬细胞由于具有趋化性，会向异物处聚集，将其内吞入细胞质，形成吞噬泡，然后吞噬泡与溶酶体融合，将异物消化分解。 吞噬泡的形成需要有微丝及其结合蛋白的帮助，如果用降解微丝的药物细胞松弛素B处理细胞，则可阻断吞噬泡的形成；免疫抑制剂环磷酰胺（CYP）对巨噬细胞的吞噬作用也有影响。 通过观察细胞对鸡红细胞、酵母菌等的吞噬，计算吞噬百分数和吞噬指数，可以分析判断机体的免疫水平。 实验用品 1．器材：显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、注射器、载玻片、盖玻片、吸管等 2．试剂： 0.85%生理盐水；阿氏（Alsever）血液保存液；蛋白胨2.0g加水100ml灭菌备用。 3．材料：小白鼠；1%鸡红细胞悬液 方法与步骤 鸡翼下静脉取血后，加生理盐水离心两次，然后根据获得的红细胞的体积加入适量的生理盐水，调至鸡红细胞浓度为1%。 实验报告 镜检时，你能在视野中看到几种类型的细胞？ 计算吞噬细胞的吞噬指数和吞噬百分数。 活化的吞噬细胞的数量 吞噬百分数= 100个吞噬细胞 活化的吞噬细胞中吞噬的鸡红细胞的总量 吞噬指数= 100个活化的吞噬细胞 * * 实验前三天，每天向小鼠腹腔注射2%的蛋白胨溶液1ml，实验前1小时，向腹腔内注射1%鸡红细胞1ml。 在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水，向其中滴加一滴腹腔液，静置10分钟，使腹水细胞贴壁，弃去生理盐水，待其稍干后，进行瑞氏染色。 未被吞噬的鸡红细胞 吞噬了鸡红细胞的吞噬细胞 *