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第五章 微生物分布及消毒灭菌 本章提要： 第一节　微生物的分布 　第二节　消毒灭菌　 第一节　微生物在自然界中的分布 一、土壤中的微生物 二、水中的微生物 水环境：地球的70%左右由水覆盖，其中溶解 和悬浮有机、无机物，流动水有氧渗 入可供微生物生长。 ?微生物种类： 水中有机物含量多少决定微生物种类。 作用：在水生环境的食物链中起关键作用。 三、空气中的微生物 环境：不利于微生物生长，所以无固定种类，?种类分布：主要是真菌和细菌，在医院，公共 场所致病菌的数量多。 科赫沉降法：打开皿盖5分钟进行培养，一般 认为皿内100cm2上微生物的数量  等于10m3空气中微生物的数量。 作用：可迅速全球传播，对地球上生物繁衍　　　　有一定意义。 四、生物体内外（以人为例） 正常菌丛：生活在健康动物各部位，数量大、种类较稳定且一般是有益无害的微生物。 条件致病菌：凡属正常菌群的微生物，由于 机体防御性降低、生存部位的改变或因数 量剧增等情况而引起疾病者。 菌群失调：正常菌群由于某些外界因素的影 响，使其中各种微生物间的相互制约关 系破坏，能引起疾病。 2. 根际微生物和附生微生物 1）根际微生物：利用根系分泌的物质大量繁 殖的微生物。 作用：加强土壤有机物分解，为植物提供 养分； 分泌激素、维生素；产生抗 生素，抑制病源菌生长。 有害影响：与植物争夺养分、分泌有毒物质。 2）附生微生物：利用植物表面外渗和分泌物 质为营养的微生物。 第二节　消毒灭菌 二、消毒灭菌的方法 （一）物理消毒灭菌法 （二）化学消毒法 （一）物理消毒灭菌法 1.热力灭菌法 　　　热力灭菌法分干热灭菌和湿热灭菌两大类。在同一温度下， 后者效力比前者为大，这是因为： （1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固； （2）湿热的穿透力比干热大； （3）湿热的蒸汽有潜热存在。水由气态变为液态时释放出的潜热，可迅速提高被灭菌物体的温度。 干热灭菌法 1.焚烧：是一种彻底的灭菌方法，但仅适用于废弃物品或尸体等。 2.烧灼：直接用火焰灭菌，适用于微生物学实验室的接种环、试管口等的灭菌（图3-2）。 3.干烤：用烤箱灭菌。一般加热至160℃～170℃经2小时。适用于高温下不变质、不蒸发的物品， 如玻璃器皿、瓷器等。。 湿热灭菌法 1.煮沸法：1个大气压下，煮沸的水温为100℃，一般细菌繁殖体煮沸5分钟即被杀死。细菌芽胞常 需煮沸1～２小时，才被杀死。水中加入 2%碳酸钠，既可提高沸点达105℃，促进细菌芽胞的杀灭，又 可防止金属器皿生锈。 2.巴氏消毒法（pasteurization）:用较低温度杀灭液体中的病原菌、同时又不影响消毒物品的营 养成分及香味的消毒方法。加热61.1～62.8℃半小时即可，常用于牛奶和酒类等的消毒。 3. 间歇灭菌法（fractional sterilization）:是利用反复多次的流通蒸汽加热，杀死细菌所有 繁殖体和芽胞的灭菌法。具体做法是将待灭菌的物品置于阿诺流通蒸汽灭菌器内，100℃ 加热15～30分 钟，杀死其中的细菌繁殖体，然后将物品置于37℃温箱中过夜使芽胞发育成繁殖体，次日再通过流通蒸 汽加热，如此连续三次，可将所有细菌繁殖体和芽胞全部杀死。 4.高压蒸汽灭菌法：是灭菌效果最好、目前应用最广的灭菌方法。方法是在一密闭蒸锅—高压蒸汽 灭菌器内进行的。加热时蒸汽不能外溢，容器内温度随蒸汽压的增加而升高，杀菌力也大为增强。通常 在1.05kg/cm2的压力下，温度达121.3℃,维持15～30分钟，可杀死包括细菌芽胞在内的所有微生物。 此法适用于耐高温和不怕潮湿物品的灭菌。 2.紫外线与射线灭菌法 1.紫外线：紫外线的杀菌作用与其波长有关，通常紫外线波长为240～280nm时具有杀菌作用，其中 以260nm最强，这与细菌DNA吸收光谱范围相一致。紫外线杀菌机理主要是作用于细菌DNA，使同一条DNA 链上相邻的两个胸腺嘧啶共价结合而形成嘧啶二聚体，因而改变DNA的分子构型，干扰细菌DNA的复制与 转录，导致细菌的死亡或变异。紫外线穿透力差，故只适用于空气及不