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【精品】江苏2013年的生物高考热点预测课件：8.1微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用
第1讲 微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用;一、微生物的基本技术
1.培养基的制备
计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
2.无菌技术：主要包括消毒和灭菌
(1)消毒方法：常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。
(2)常用灭菌方法：
①灼烧灭菌：接种环、接种针等金属器具。
②干热灭菌：主要针对玻璃器皿等。
③高压蒸汽灭菌：主要针对培养基等。;3.倒平板操作;4.平板划线操作
平板划线法通过接种环在固体培养
基表面连续划线的操作，将聚集的
菌种逐步稀释分散到培养基的表
面。注意划线的方法（见图）。;5.涂布分离法
先将菌液进行一系列梯度稀释后涂布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散到培养基的表面，从而在培养基表面形成单个菌落。如图：;【特别提醒】
(1)制备固体培养基最后要将平板倒置，其主要目的是防止培养皿盖上的水珠滴入培养基造成污染。
(2)划线分离法中的“连续划线”及涂布分离法中的“系列稀释”目的是一样的，都是为了保证菌种在培养基中单个分布(划线分离法中最后一次划线的末端)。 ;二、微生物的分离与计数
1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
（1）筛选菌体：选择以尿素为惟一氮源的选择培养基。
（2）统计菌落数目的方法：
①显微镜直接计数法：
a.原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。
b.方法：用计数板计数。
c.缺点：不能区分死菌与活菌。;②间接计数法（活菌计数法）：
a.原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
b.操作：设置重复组，增强实验的说服力与准确性。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
c.计算公式：每克样品中的菌株数=（C÷V）×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。;（3）菌种鉴定：
在选择培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则说明该种细菌能分解尿素。;2.分解纤维素的微生物的分离
（1）原理：
即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
（2）流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落。;【特别提醒】
（1）分离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基，因为菌落只能在固体培养基上生成。
（2）平板划线法只适合用于微生物的提纯，不适合进行计数，并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯。
（3）分离能分解纤维素的微生物时，有时需要进行选择培养，选择培养的目的是增大选择对象在样液中的浓度，以确保用刚果红染色法鉴别时确实能得到所需菌种。 ;三、传统发酵技术的应用;Evaluation only.
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（1）果酒和果醋的制作要注意温度、气体和发酵时间的控制。
（2）腐乳制作中盐、酒和各种香辛料的作用有共同之处：既具有调味作用，也具有杀菌防腐的作用。;【热点考向1】微生物的培养与应用
高考频次3年9考 预测指数☆☆☆
【典题训练1】（2012·滨州模拟）下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的牛肉膏、蛋白胨培养基的配方。;（1）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、____和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是____。
（2）分离纯化微生物最常使用的接种方法是____________
和______两种。在接种过程中，接种环或涂布器的灭菌方法是_________。
（3）假设某同学发现培养基上细菌数目过多连成一片，说出一种可能的原因并提出合理的处理措施。
原因：_________________；措施：_____________________。;（4）对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养，则大肠杆菌的增长呈现________型曲线增长。
（5）该培养基_____（“能”或“不能”）用于筛选土壤中的纤维素分解菌。在筛选纤维素分解菌时，常加入的一种染料是__________，该染料可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，所以可以通过是否产生_______来筛选纤维素分解菌。;【规范答题】（1）生物术语规范：平板划线法、稀释涂布平板法、稀释倍数、刚果红染液、透明圈。
（2）审题规范：第（3）小题中“细菌数目过多连成一片”，说明细菌的密度过大，应与稀释倍数联系起来。第（4）小题中注意培养细菌的场所是“大试管”，虽然是大试管，但空间和其中的营养液毕竟有限。;【解析】（1）培养基的成分
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