第七章微生物遗传变异技术总结.ppt

（二）噬菌体感染实验（A. D. Hershey和M. Chase） 以32P标记核酸做噬菌体感染实验 以35S标记蛋白质外壳做噬菌体感染实验 （2）含35S-蛋白质的一组：放射性75%在上清液中 第三节 基因重组和杂交育种 定义：两个独立基因组内的遗传基因，通过一定的途经转移在一起，形成新的稳定基因组的过程称为基因重组或遗传重组。 作用：重组可使生物体在未发生突变的情况下，也能产生新遗传型的个体。 获得目的基因 选择基因载体 体外重组 外源基因导入（细菌、植物、动物、基因枪） 筛选和鉴定 工程菌或工程细胞的大规模培养 二、基因工程的基本操作 第五节 菌种的衰退、复壮和保藏 性状稳定的菌种是微生物学工作最重要的基本要求，否则生产或科研都无法正常进行。 影响微生物菌种稳定性的因素： a）变异；b）污染； c）死亡。 一、菌种的衰退与复壮 菌种衰退的原因：大量群体中的自发突变 纯菌种 自发突变 不纯菌种 突变个体 传代增殖 原始个体 衰退菌种 衰退：菌种出现或表现出负变性状 菌种衰退的具体表现： 1、原有的形态、性状变得不典型了 2、生长速度变慢，产生孢子变少 3、代谢产物生产能力下降 4、致病菌对宿主的侵袭力的下降 5、对外界不良条件包括低温、高温等抵抗力下降 1）从衰退的菌种群体中把少数个体再找出来，重新获得具有原有典型性状的菌种。 a）纯种分离； b）通过寄主体进行复壮； c）淘汰已衰退的个体 2）有意识地利用微生物会发生自发突变的特性，在日常的菌种维护工作中不断筛选“正变”个体。 菌种的复壮： 二、防止衰退的措施 1）减少传代次数； 2）创造良好的培养条件； 3）利用不易衰退的细胞后代 4）采用有效的菌种保藏方法； 基本方法 培养基传代培养（斜面、平板） 寄主传代培养 低温（液氮、低温冰箱） 干燥（沙土管、真空干燥） 生活态 休眠态 三、菌种保藏 目的：在一定时间内使菌种不死、不变、不乱，以供研究、生产、交换之用 基本原则： 1、挑选典型菌种的优良纯种 2、尽量使用分生孢子、芽孢等休眠体 3、创造有利于休眠的保藏环境（如干燥、低温） 4、尽可能多的采用不同的手段保藏一些比较重要的微生物菌株 遗 传 变 异和育种 物质基础：DNA或RNA 存在的部位和方式 质粒 定义 构型 优点 种类 基因突变：定义和特点以及分类 遗传 变异和育种 DNA损伤的修复机制 诱变育种的原则 诱变育种的基本过程 知识结构 基因重组和杂交育种 原核生物的基因重组 真核微生物的基因重组 基因工程 概念 基本操作 菌种的衰退、复壮和保藏 1、已 知 DNA 的 碱 基 序 列 为 CATCATCAT， 什 么 类 型 的 突 变 可 使 其 突 变 为：CTCATCAT ( ) A.缺 失 B. 插 入 C.颠 换 D.转 换 2、已 知 DNA 的 碱 基 序 列 为 CATCATCAT， 什 么 类 型 的 突 变 可 产 生 如 下 碱 基 序 列 的 改 变：CACCATCAT ？( ) A. 缺 失 B. 插 入 C. 颠 换 D. 转 换 3、不 需 要 细 胞 与 细 胞 之 间 接 触 的 基 因 重 组 类 型 有( ) A. 接 合 和 转 化 B. 转 导 和 转 化 C. 接 合 和 转 导 D. 接 合 4、转 化 现 象 不 包 括 ( ) A. DNA 的 吸 收 B. 感 受 态 细 胞 限 制 修 饰 系 统 D. 细 胞 与 细 胞 的 接 触 5、以 下 碱 基 序 列 中 哪 个 最 易 受 紫 外 线 破 坏？ A. AGGCAA B. CTTTGA C. GUAAAU D. CGGAGA 6、一 个 大 肠 杆 菌 (E.coli) 的 突 变 株， 不 同 于 野 生 型 菌 株， 它 不 能 合 成 精 氨 酸， 这 一 突 变 株 称 为： A. 营 养 缺 陷 型 B. 温 度 依 赖 型 C. 原 养 型 D.抗 性 突 变 型 7、在 普 遍 性 转 导 中， 同 源 DNA 分 子 的 交 换 要 求： 转 座 子 B. 插 入 序 列 C. DNA 链 的 断 裂 和 重 新 连 接 反 转 录 8、抗药性质粒（R因子）在医学上很重要是因为它们：（ ） A.可引起某些细菌性疾病