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生化药物生产项目报的告书
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1.1核酸相关知识
1.1.1核酸简介
由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,为生命的最基本物质之一。核酸广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物内、生物体内核酸常与蛋白质结合形成核蛋白。不同的核酸,其化学组成、核苷酸排列顺序等不同。在一定理化因素作用下,核酸双螺旋等空间结构中碱基之间的氢键断裂,变成单链的现象称为变性。引起核酸变性的常见理化因素有加热、酸、碱、尿素和甲酰胺等。变性DNA在适当条件下,可使两条分开的单链重新形成双螺旋DNA的过程称为复性
1.1.2种类
核酸同蛋白质一样,也是生物大分子。核酸的相对分子质量很大,一般是几十万至几百万。核酸水解后得到许多核苷酸,实验证明,核苷酸是组成核酸的基本单位,机组成核酸分子的单体。一个核苷酸分子是由一分子含氮的碱基(称碱基)、一分子五碳糖(即五碳糖)和一分子磷酸组成的。根据五碳糖的不同可以将核苷酸分为脱氧核糖核苷酸(DNA)和核糖核苷酸(RNA)。
DNA存在多级结构
DNA的一级结构即由核苷酸聚合而成的生物大分子。
DNA二级结构即双螺旋结构(double helix structure)。
DNA三级结构是指DNA链进一步扭曲盘旋形成超螺旋结构。
DNA的四级结构——DNA与蛋白质形成复合物
1.1.3作用
核酸在蛋白质的复制和合成中起着储存和传递遗传信息的作用。核酸不仅是基本的遗传物质,而且在蛋白质的生物合成上也占重要位置,因而在生长、遗传、变异等一系列重大生命现象中起决定性的作用。
DNA是储存、复制和传递遗传信息的主要物质基础,RNA在蛋白质合成过程中起着重要作用,其中转运核糖核酸,简称tRNA,起着携带和转移活化氨基酸的作用;信使核糖核酸,简称mRNA,是合成蛋白质的模板;核糖体的核糖核酸,简称rRNA,是细胞合成蛋白质的主要场所。
A.积极作用
核酸在实践应用方面有极重要的作用,现已发现近2000种遗传性疾病都和DNA结构有关。如人类镰刀形红血细胞贫血症是由于患者的血红蛋白分子中一个氨基酸的遗传密码发生了改变,白化病患者则是DNA分子上缺乏产生促黑色素生成的酪氨酸酶的基因所致。肿瘤的发生、病毒的感染、射线对机体的作用等都与核酸有关。70年代以来兴起的遗传工程,使人们可用人工方法改组DNA,从而有可能创造出新型的生物品种。如应用遗传工程方法已能使大肠杆菌产生胰岛素、干扰素等珍贵的生化药物。
核酸氧化分解后变成了磷酸和碱基的嘌呤和嘧啶,目前还没有发现嘧啶有何害处,但嘌呤是导致人类尿酸增高和痛风的主要原因。
B.消极作用
核酸氧化分解---生成嘌呤---嘌呤在肝脏进一步氧化成为(2,6,8--三氧嘌呤)又称为尿酸,尿酸盐沉积到关节腔等组织引起痛风发作。
因此,核酸不是越多越好,同时,这也说明了为什么中老年易患痛风,因为年纪来了,大量的细胞死亡,而细胞内有大量的核酸,生成嘌呤,再生成尿酸,从而导致痛风发作。防治好痛风就是要防止核酸被氧化。
1.1.4核酸的组成
核酸同蛋白质一样,也是生物大分子。核酸的相对分子质量很大,一般是几十万至几百万。核酸由C、H、O、N、P,5种元素组成。核苷酸是组成核酸的基本单位,是组成核酸分子的单体,核酸是核苷酸通过3’,5’-磷酸二酯键连接的。单个核苷酸是由含氮有机碱(称碱基)、戊糖(即五碳糖)和磷酸三部分构成的。
碱基:构成核苷酸的碱基分为嘌呤和嘧啶二类。嘌呤主要指腺嘌呤(A)和鸟嘌呤(G),DNA和RNA中均含有这二种碱基。嘧啶主要指胞嘧啶(C)胸腺嘧啶(T)和尿嘧啶(U),胞嘧啶(C)为DNA和RNA共有,而胸腺嘧啶(T)只存在于DNA中,尿嘧啶(U)则只存在于RNA中。
1.1.5 DNA与RNA的区别
核酸 DNA RNA 名称 脱氧核糖核酸 核糖核酸 结构 规则的双螺旋结构 通常呈单链结构 基本单位 脱氧核糖核苷酸 核糖核苷酸 五碳糖 脱氧核糖 核糖 含
氮
碱
基 A(腺嘌呤) A(腺嘌呤) G(鸟嘌呤) G(鸟嘌呤) C(胞嘧啶) C(胞嘧啶) T(胸腺嘧啶) U(尿嘧啶) 分
布 主要存在于细胞核,少量存在于线粒体和叶绿体 主要存在于细胞质
功
能 绝大多数生物的遗传物质,携带遗传信息,在生物体的遗传、变异和蛋白质的生物合成中具有极其重要的作用 作为遗传物质:只在RNA病毒中;不作为遗传物质:在DNA控制蛋白质合成过程中起作用。mRNA是蛋白质是合成的直接模板、tRNA能携带特定氨基酸、rRNA是核糖体的组成成分;催化作用:酶的一种
1.2核酸的制备
核酸几乎存在所有生物的细胞中,所以制备的原料多种多样,采用的生物材料不同,制备的方法也会有所不同,但基本原理都是一样的。
首先破碎细胞,释放细胞内容物,即释放出核酸,常见的破碎细胞的方法有组织粉碎机、研钵、超声波、酶处理、冻融
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