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生物选修3 一，基因工程 1.基因工程概述〖概念〗　　基因工程：是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。〖目的〗　　产生出人类所需要的基因产物。〖原理〗　　基因重组。〖实质〗　　在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。〖特点〗　　基因工程能够打破种属的界限，在基因水平上改变生物遗传性，并通过工程手段为人类提供有用的产品及服务。〖总结〗1、基因工程的技术水平：基因拼接技术或DNA重组技术。2、基因工程的操作水平： DNA分子水平。2.基因的种类（1）编码蛋白质的基因：包括结构基因调节基因。（2）没有转译产物的基因：如rRNA基因和tRNA基因。（3）不能转录的DNA片段：如操纵基因。3.基因的结构〖内容〗1、启动子：　　启动子是在非编码区内紧靠转录起点，调控遗传信息表达的脱氧核苷酸序列，它能引导RNA聚合酶与正确的基因部位结合，使转录从起点开始，沿编码区进行。　　基因表达载体中的启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质。2、终止子：　　终止子是在非编码区内紧靠转录终点，调控遗传信息表达的脱氧核苷酸序列，它能阻碍RNA聚合酶的移动，并使其从DNA模板链上脱离下来，使转录终止。　　基因表达载体中的终止子：位于基因的尾端，也是一段有特殊结构的DNA片段，使转录在所需要的地方停止下来。〖总结〗1、原核细胞与真核细胞的基因结构比较：（1）相同点：　　都由能够编码蛋白质的编码区和具有调控作用的非编码区组成的。（2）不同点：　　原核细胞：编码区是连续的；　　真核细胞：编码区是间隔的、不连续的。4.原核细胞的基因结构〖内容〗　　原核细胞基因包含：编码区和非编码区；1、编码区（编码序列）：　　能指导有关蛋白质的合成，即能够编码蛋白质；编码区是连续的，所有碱基对均能编码蛋白质。2、非编码区（调控序列）：　　位于编码区上游和编码区下游的DNA序列，虽不能指导有关蛋白质的合，但有调控遗传信息表达的核苷酸序列，如启动子、终止子等。〖涉及概念〗　　RNA聚合酶的作用是催化DNA转录为RNA。它能够识别调控序列中的结合位点，并与其结合。转录开始后，RNA聚合酶沿DNA分子移动，并以DNA分子的一条链为模板合成RNA。5.真核细胞的基因结构〖内容〗1、编码区（间隔、不连续）：　　包含外显子（能编码蛋白质的DNA序列）；内含子（不能编码蛋白质的DNA序列）。2、非编码区：　　与原核生物具有相似功能的启动子、终止子。〖涉及概念〗　　外显子：真核细胞基因编码区中，能够编码蛋白质的序列。　　内含子：真核细胞基因编码区，一般不能够编码蛋白质的序列。〖特点〗　　编码区是间隔的、不连续的。也就是说，能够编码蛋白质的序列被不能够编码蛋白质的序列分隔开来，成为一种断裂的形式。6.基因工程的三种基本工具1、限制性核酸内切酶；2、DNA连接酶；3、载体。7.限制性核酸内切酶〖概念〗　　限制酶是在生物体（主要是微生物）内的一种酶，能将外来的DNA切断；由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶。〖特点〗　　特异性：即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子，使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 8.磷酸二酯键〖定义〗　　连接脱氧核糖与磷酸之间的键为磷酸二酯键。〖关键点〗　　DNA聚合酶，限制性内切酶，DNA连接酶都可作用于磷酸二酯键。9.黏性末端　　被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。　　黏性末端示意图：10.平末端　　限制酶在它识别的序列的中心轴线处切开时，双链核酸的末端是对应吻合的没有突出的单链核苷酸，这种末端就称为平末端。　　平末端示意图：11.DNA连接酶〖定义〗　　DNA连接酶：能够将两条DNA链连接起来的酶。〖涉及概念〗　　DNA聚合酶：是以DNA为复制模板，从将DNA由5 端点开始复制到3 端所需的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成。〖类型〗1、E.coliDNA连接酶：　　只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，不能将双链DNA片段平末端之间进行连接。2、DNA连接酶：　　既可“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端