耐门冬酰胺酶的急性T淋巴细胞白血病细胞生物学特性研究.pdfVIP

中文摘要 耐门冬酰胺酶的急性T淋巴细胞白血病细胞 生物学特性研究 研究生 赵慧芳 导 师宋永平 郑州大学第一附属医院血液科 河南 郑州450052 摘要 研究背景 目前，尽管急性淋巴细胞白血病(Acutelymphoblasticleukemia；ALL)的 预后得到很大的改善。然而，由于化疗耐药因素的存在导致许多患者难以 获得缓解或最终复发。近来，随着对肿瘤干细胞(cancelstem cell；CSC)研 究的深入，越来越多的研究认为肿瘤的复发和转移，其罪魁祸首是由于CSC的 存在，而人们在进行“CSC”生物学特性研究中发现，多药耐药性是CSC的重 要特性之一。而耐药的ALL细胞中是否同样存在CSC?本研究中应用治疗ALL 其耐药，建立耐药细胞系。应用实时定量PCR法、流式细胞学法检测耐药ALL 细胞系的CSC相关基因的表达情况、细胞表面抗体表达变化情况、侧群细胞(side 多药耐药的机制以及多药耐药和CSC之间的关系，从而为自血病的靶向治疗和 耐药逆转等提供实验依据。 中文摘要 目的 探讨耐门冬酰胺酶的急性T淋巴细胞白血病细胞的生物学特性。 方法 导Jurkat细胞耐药，建立耐L．asp的急性T淋巴细胞白血病细胞株。观 察其形态学特征及生长特性，MTT比色法分析耐药细胞系的耐药图谱 和耐药指数。 细胞耐药前后的细胞膜表面标志的变化情况。 用流式细胞学法检测SP细胞含量。 Sox-2、Oct-4、Nanog基因的表达情况。 争士申 耋日术 1．成功建立了能够在0．5u／ml的L．asp培养液中稳定生长的耐药细胞株， 命名为．3urkat／L．asp。 2．MTT比色法分析了其耐药图谱，结果显示：Jurkat／L．asp对柔红霉素、 依托泊苷、甲氨蝶呤、阿糖胞苷耐药指数是Jurkat的15．5、9．59、4．28、 4．98倍。 3．实时定量PCR扩增结果显示人急性淋巴细胞白血病细胞系 胞和Jurkat细胞中的表达无明显统计学意义(尸O．05)。 II 中文摘要 细胞用Hoechst33342染色，对比维拉帕米抑制试验，在流式细胞仪上检测 Jurkat细胞中SP细胞含量为O％。 结论 1．耐门冬酰胺酶急性T淋巴细胞白血病细胞为多药耐药细胞。 2．耐门冬酰胺酶急性T淋巴细胞白血病细胞具有一定的肿瘤干细胞的特 性。 关键词 白血病；多药耐药；肿瘤干细胞；流式细胞术；侧群细胞 III Abstract on of StudybiologicalpropertiesL--asparaglnase_‘ resistantacute leukemiacells lymphoblastic Zhao PostgraduateHuifang SupervisorYongpingSong of Departmenthematology， theFirstAffiliated of Hos