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获取目的基因 从基因文库中获取目的基因 利用PCR技术扩增目的基因 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 植物、动物、微生物 目的基因的检测与鉴定 检测:分子水平是否插入、转录、翻译 鉴定:个体水平 小节: 基因工程的基本操作程序 基因工程的基本工具? 限制酶的特点? DNA连接酶和载体的种类? 基因工程的基本操作程序? 获取目的基因的方法? 基因工程的核心步骤是? 基因表达载体的组成? 将目的基因导入植物、动物、微生物细胞的方法? 目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键? 目的基因的检测与鉴定的方法? 复习 一、植物基因工程硕果累累 转基因工程技术主要用于提高农作物的抗逆能力,以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。 (一)抗虫转基因植物 杀虫基因: Bt毒蛋白基因 蛋白酶抑制剂基因 淀粉酶抑制剂基因 植物凝集素基因 Bt毒蛋白基因 蛋白酶抑制剂基因 淀粉酶抑制剂基因 植物凝集素基因 产生的抑制剂可与害虫消化道的蛋白酶结合 淀粉酶抑制剂抑制昆虫消化道中的淀粉酶活性 合成的糖蛋白可与昆虫肠道粘膜上的某种物质结合 编码的蛋白质在害虫肠道降解成有毒的多肽 转基因抗虫棉 (二)抗病转基因植物 病原微生物: 主要有病毒、真菌和细菌等。 抗病转基因植物采用的基因: 抗真菌转基因植物采用的基因: 病毒外壳蛋白基因(CP基因) 病毒复制酶基因 几丁质酶基因 抗毒素合成基因 (三)抗逆转基因植物 可以调节细胞渗透压的基因 抗冻蛋白基因 抗除草剂基因 (四)利用转基因改良植物的品质 将必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因导入植物;改变这些氨基酸合成途径中某种关键酶的活性。 例如:将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米,赖氨酸含量提高30%。 将控制番茄果实成熟的基因导入番茄,获得转基因延熟番茄; 将植物花青素代谢有关的基因导入花卉植物矮牵牛中,出现颜色变异。 二、动物基因工程前景广阔 1.用于提高动物生长速度 2.用于改善畜产品的品质 外源生长素基因 将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组 普通鼠和生长速度加快的转基因鼠(右) 3.用转基因的动物生产药物 乳腺生物反应器 乳房生物反应器 将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起。 获取目的基因(例如血清蛋白基因) 构建基因表达载体 (在血清白蛋白基因前加特异表达的启动子) 显微注射导入哺乳动物受精卵中 形成胚胎 将胚胎送入母体动物 发育成转基因动物(只有在产下的雌性动物个体中,转入的基因才能表达) 4.用转基因的动物作器官移植的供体 1、供体动物: 2、存在的难题: 3、解决方法: 将供体基因组导入某种基因调节因子,以抑制抗原决定基因的表达; 或设法除去抗原决定基因,再结合克隆技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。 猪 免疫排斥 三.基因工程药品异军突起 利用基因工程方法制造“工程菌”,可高效率地生产出各种高质量、低成本的药品。 我国已生产的产品:白细胞介素-2、干扰素、乙肝疫苗等。 近20种,年产值达30亿。 工程菌:用基因工程的方法,使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系。 作用:胰岛素是治疗糖尿病的特效药。 传统生产方法: 主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取,每100kg胰腺只能提取4~5g胰岛素。产量低,价格昂贵。 基因工程方法:1979年,科学家将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重组,并在大肠杆菌内实现了表达。 1982年,美国一家基因公司用基因工程方法生产的胰岛素投入市场,售价降低了30%~50%。 基因工程药品 —— 胰岛素 基因工程药品 —— 干扰素 化学本质:是病毒侵入动物或人体细胞后产生的一种糖蛋白。 作用:抗病毒的特效药。 干扰素产品 基因工程药品 —— 生长激素 治疗侏儒症的唯一方法:是向人体注射生长激素。 传统生产方法:需解剖尸体,从大脑的底部摘取垂体,并从中提取生长激素。 基因工程方法,将人的生长激素基因导入大肠杆菌中,使其生产生长激素。 人们从 450 L大肠杆菌培养液中提取的生长激素,相当于6万具尸体的全部产量。 优 秀 课 件 尽 在 海 波 飞 更多精彩: 优 秀 课 件 尽 在 海 波 飞 扬 扬 目的基因的获取 基因表达载体的构建 目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 有了目的基因,我们才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性。 使目的基因在受体细胞中稳定存在,并可进行遗传、表达和发挥作用 载体进入受体细胞稳定表达,才能实现一种生物的基因在另一种生物中的转化。 才能确定目的基因是否真正在受体细胞中稳定遗传和正确表达。 基因工程基本操作的四个步骤 1 2 3 4 (一)目的基因
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