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基层医院环境卫生学检测 一、空气采样及检查方法 1、采样的时间 选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 2、采样高度 与地面垂直高度80-150cm。 3、布点方法 室内面积≤30m2,设一条对角线上取3点，即中心一点、两端各距墙1m处各取一点；室内面积＞30m2,设东、南、西、北、中5点，其中东、南、西、北点均距墙1m。 4、采样方法 用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检培养。 5、普通营养琼脂培养基 按GB4789.28中4．7配制 1）成分： 蛋白胨10g 牛肉膏3 g 氯化钠5 g 琼脂15-20 g 蒸馏水1000 ml 2）制法 将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水，加入15%氢氧化钠约2 ml校正PH至7.2-7.4。加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。分装烧瓶，121高压灭菌15分钟。 (注)：此培养基可供一般细菌培养之用，可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数，琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%。 6、检查方法：参照化妆品卫生规范规定执行。 1）定义：菌落总数是指样品经过处理，在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、PH值、需养性质等），1g(1ml)检样中所含菌落的总数。所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性菌落总数。 测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程度，是对样品进行卫生学总评的综合依据。 2）操作步骤： （1）用灭菌吸管吸取1：10稀释的检液2ml,分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1ml。另取1ml注入到9ml灭菌生理盐水试管中（注意勿使吸管接触液面），更换一支试管，并充分混匀，制成1：100检液。吸取2ml,分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1ml。如样品含菌量高，还可再稀释成1：1000，1：10000，…….等，每种稀释度应换1支吸管。 （2）将融化并冷至45～50℃的营养琼脂培养基倾注到平皿内，每皿15ml，随即转动平皿，使样品与培养基充分混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平皿，置36± 1℃培养箱内培养48h ± 2h。另取一个不加样品的灭菌空平皿，加入15ml营养琼脂培养基，待琼脂凝固后，翻转平皿，置36± 1℃培养箱内培养48h ± 2h，为空白对照。 3 ）菌落计数方法： 先用肉眼观察，点菌落数，然后再用放大5～10倍的放大镜检查，以防遗漏。记下各平皿的菌落数后，求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有成片状的菌落或者花点样菌落蔓延生长时，该平皿不宜计数。若片状菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘以2，以代表全皿菌落数。 4）.菌落计数及报告方法 （1 ）首先选取平均菌落数在30～300个之间的平皿，作为菌落总数测定的范围。当中有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平皿菌落数乘以稀释倍数 （见表1中例1） （2 ） 若有两个稀释度，其平均菌落数均在30个～300个之间，则应求出两个菌落总数之比值来决定，若其比值小于或者等于2，应报告其平均数，若大于2则报告其中稀释度较低的平皿的菌落数 （见表1中例2及例3） （3 ） 若所有稀释度的平均菌落数均大于300个，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之 （见表1中例4） （4） 若所有稀释度的平均菌落数均小于30个，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之 （见表1中例5） （5 ）若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300个之间，其中一个稀释度大于300个，而相邻的另一个稀释度小于30个时，则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之 （见表1中例6） （6） 若所有的稀释度均无菌生长，报告数为每g或每ml小于10CFU。 （7 ） 菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告之，大于100时,采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，应以四舍五入法计算。为了缩短数字后面零的个数，可用10的指数来表示（见表1报告方式栏）。在报告菌落数为“不可计”时，应注明样品的稀释度。 表1 细菌计数结果及报告方式 例次 不同稀释度平均菌落数 两稀释度 菌落总数 报告方式 菌落之比 （CFU/ml或CFU/g) （CFU/m