遗传学实验实验一 动植物减数分裂过程中染色体行为的观察.ppt

实验一 动植物减数分裂过程中染色体行为的观察 七、注意事项 1. 取材时间的早晚是影响实验成功与否的一个关键因素。 2. 正确区分花粉母细胞和花药壁细胞，两者形态差别显著之处在于：花粉母细胞外被一透明圈包围，而花药壁细胞则无。 * 一、实验目的 1．学习和掌握细胞减数分裂染色体标本的制片技术和方法。 2．通过观察进一步熟悉减数分裂的全过程及各个时期染色体的动态变化和形态特征。 二 实验原理 减数分裂是进行有性繁殖的动植物性母细胞成熟、形成配子的过程中出现的一种特殊分裂方式。减数分裂过程中染色体复制一次，进行两次连续的有丝分裂——减数第一次分裂（减数Ⅰ）和减数第二次分裂（减数Ⅱ）；每次分裂都可分为紧密衔接的前、中、后、末四个时期，以前期Ⅰ变化最为复杂，又可分为细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。通过减数分裂所形成的四分体细胞（或雌、雄配子），其染色体数目只有体细胞的一半。 减数分裂的遗传学意义：保证了有性生殖生物个体世代之间染色体数目的稳定性；为有性生殖过程中创造变异提供了遗传的物质基础。 减数分裂细胞染色体制片取材以高等动、植物雄性生殖分裂较为方便。在适当的时机采集动物精巢或植物花蕾(花序)，经适当技术处理，压片就可在显微镜下观察到细胞的减数分裂过程。 三 实验材料 大葱或韭菜花序、蝗虫精巢 四 实验器具、药品试剂 显微镜，染缸，酒精灯，培养皿，载玻片，盖玻片，镊子，解剖针(或大头针)，刀片，擦镜纸，吸水纸，标签，铅笔等。 卡诺氏固定液，改良苯酚品红染液 五 实验方法 1．取材 能否获得处于适当减数分裂期的材料是制片成败的关键点。田间取材的主要依据是植物外部形态指标，因此必需掌握各种植物减数分裂不同时期对应的外部形态指标。 取材时间主要看植物生长发育的最适温度而定。气温过低会影响减数分裂的正常进行，这时取材细胞常常处于前期、末期等时期，而终变期、后期、中期图像少；温度过高(30℃以上)时植株新陈代谢旺盛，减数分裂周期缩短，核质粘连严重，也不易获得理想的制片和观察效果。为了获得理想的减数分裂图像，取材时间一般是上午8:00～10:00。 2．固定 最常用的固定液是卡诺氏液。将取得幼嫩花序或花蕾立即投入固定液中，处理12～24h。倒去固定液，用梯度乙醇(95％-80％-70％)依次浸泡漂洗5～30min，直至去除乙酸味。固定后可置70％乙醇中保存，于4 ℃冰箱内可保存数年。经过固定处理的材料更易于染色、分色和保存。 3．涂抹 选取三个花蕾（大、中、小各一个）放在载玻片上。用吸水纸吸去多余的保存液，用解剖针在三个花蕾中各取一个花药，清除其他残余物。 用洁净的刀片或镊子压在花药上向一端轻轻抹去，将花粉母细胞压挤出来，或者用大头针钝端直接捣碎花药，把花粉母细胞(呈半透明胶状)在小范围内涂成薄层。 4．染色 在涂好的载玻片上滴加一滴或半滴染液(视滴管大小而定，由于花粉母细胞在压片过程中特别容易随染液溢出，所以滴加染液宜少不宜多)，静置染色8-10分钟，染色结束剔除花药残体。 5．初检与压片 染色后置于低倍显微镜下初步检查，若花粉母细胞正处于分裂期，即可覆盖盖玻片；然后以吸水纸包覆，用拇指垂直紧压，使细胞平整、染色体散开分布于同一平面，便于观察和记数；同时吸水纸可吸去盖玻片周围多余的染液。注意：勿使盖玻片发生搓动，以免破坏细胞与染色体的完整性。 六、实验图片 玉米减数分裂细线期 玉米减数分裂偶线期 玉米减数分裂粗线期 玉米减数分裂双线期 玉米减数分裂终变期 玉米减数分裂中期I 玉米减数分裂后期I 玉米减数分裂末期I 玉米减数分裂前期II 玉米减数分裂中期II 玉米减数分裂后期II 玉米减数分裂末期II 玉米减数分裂二分体期 玉米减数分裂四分体期 四分孢子 形成花粉粒 百合减数分裂前期的五个时期 *