细胞凋亡荧光 Hoechst 33342 PI 双染试剂盒.pdfVIP

细胞凋亡荧光 Hoechst 33342 /PI 双染试剂盒使用说明 产品简介： 本试剂盒采用 Hoechst 33342 和碘化丙啶 (Propidium Iodide，PI)双染 的方法。细胞发生凋亡时，染色质会固缩。Hoechst33342 可以穿透细胞膜， 染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞明显增强。碘化丙啶 (PI)不能穿透细胞膜， 对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞，其 细胞膜的完整性丧失，碘化丙啶(PI)可以染色坏死细胞。上述两种染料双染 后，使用流式细胞仪或荧光显微镜检测时，正常细胞为弱红色荧光＋弱蓝色 荧光，凋亡细胞为弱红色荧光＋强蓝色荧光，坏死细胞为强红色荧光＋强蓝 色荧光。参考下图，左图为诱导凋亡前的正常细胞，右图为诱导凋亡后的细 胞。 染色快速方便，两种染料的染色仅需 20-30 分钟，一步染色即可完成。 使用方便，使用流式细胞仪检测时，无需稀释等配制过程，也无需再准 备其它任何溶液。 本试剂盒足够检测 100 个样品，每个样品的细胞数量可以为 1×10 5 -1×10 6 。 保存：4℃保存六个月有效，-20℃保存一年有效。Hoechst 染色液和 PI 染色液需避光保存。 产品内容： 细胞染色缓冲液 100ml Hoechst 染色液 0.5ml PI 染色液 0.5ml 说明书 1 份 使用说明： 1. 每个样品收集约 10-100 万细胞于 1.5ml 离心管内，离心弃上清。 细胞沉淀用 0.8-1ml 细胞染色缓冲液重悬。 2. 加入 5 微升 Hoechst 染色液。 3. 加入 5 微升 PI 染色液。 4. 混匀，冰浴或 4℃孵育 20-30 分钟。 5. 用流式细胞仪检测红色荧光和蓝色荧光。 6. 如果使用荧光显微镜检测，检测前离心沉淀细胞，用 PBS 洗涤一次， 再涂片观察红色荧光和蓝色荧光。 对于贴壁细胞使用荧光显微镜检测，可以不收集细胞，直接依次按照上 述比例加入细胞染色缓冲液、Hoechst 染色液和 PI 染色液冰浴或 4℃染色 20-30 分钟。染色后 PBS 洗涤一次，再在荧光显微镜下观察。 注意事项： 1、需使用流式细胞仪进行红色和蓝色双荧光检测。也可使用荧光显微镜 检测。 2、染色后宜尽快检测。 3、Hoechst 33342 对人体有害，碘化丙啶(PI)对人体有刺激性，请注意 适当防护。 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。