细胞凋亡荧光 Hoechst 33342 PI 双染试剂盒.pdfVIP

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  • 2017-06-23 发布于河南
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细胞凋亡荧光 Hoechst 33342 PI 双染试剂盒.pdf

细胞凋亡荧光 Hoechst 33342 PI 双染试剂盒

细胞凋亡荧光 Hoechst 33342 /PI 双染试剂盒使用说明 产品简介: 本试剂盒采用 Hoechst 33342 和碘化丙啶 (Propidium Iodide,PI)双染 的方法。细胞发生凋亡时,染色质会固缩。Hoechst33342 可以穿透细胞膜, 染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞明显增强。碘化丙啶 (PI)不能穿透细胞膜, 对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞,其 细胞膜的完整性丧失,碘化丙啶(PI)可以染色坏死细胞。上述两种染料双染 后,使用流式细胞仪或荧光显微镜检测时,正常细胞为弱红色荧光+弱蓝色 荧光,凋亡细胞为弱红色荧光+强蓝色荧光,坏死细胞为强红色荧光+强蓝 色荧光。参考下图,左图为诱导凋亡前的正常细胞,右图为诱导凋亡后的细 胞。 染色快速方便,两种染料的染色仅需 20-30 分钟,一步染色即可完成。 使用方便,使用流式细胞仪检测时,无需稀释等配制过程,也无需再准 备其它任何溶液。 本试剂盒足够检测 100 个样品,每个样品的细胞数量可以为 1×10 5 -1×10 6 。 保存:4℃保存六个月有效,-20℃保存一年有效。Hoechst 染色液和 PI 染色液需避光保存。 产品内容: 细胞染色缓冲液 100ml Hoechst 染色液 0.5ml PI 染色液 0.5ml 说明书 1 份 使用说明: 1. 每个样品收集约 10-100 万细胞于 1.5ml 离心管内,离心弃上清。 细胞沉淀用 0.8-1ml 细胞染色缓冲液重悬。 2. 加入 5 微升 Hoechst 染色液。 3. 加入 5 微升 PI 染色液。 4. 混匀,冰浴或 4℃孵育 20-30 分钟。 5. 用流式细胞仪检测红色荧光和蓝色荧光。 6. 如果使用荧光显微镜检测,检测前离心沉淀细胞,用 PBS 洗涤一次, 再涂片观察红色荧光和蓝色荧光。 对于贴壁细胞使用荧光显微镜检测,可以不收集细胞,直接依次按照上 述比例加入细胞染色缓冲液、Hoechst 染色液和 PI 染色液冰浴或 4℃染色 20-30 分钟。染色后 PBS 洗涤一次,再在荧光显微镜下观察。 注意事项: 1、需使用流式细胞仪进行红色和蓝色双荧光检测。也可使用荧光显微镜 检测。 2、染色后宜尽快检测。 3、Hoechst 33342 对人体有害,碘化丙啶(PI)对人体有刺激性,请注意 适当防护。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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