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实验七 植物激素作用的空间和浓度效应比较 Auxin生理效应的特异性 Auxin及人工合成的类似物质如萘乙酸(NAA)等对植物生长具有调节作用。 1) Auxin的剂量效应: 不同浓度的Auxin对植物生长的效应不同。一般来说,低浓度的Auxin促进生长,高浓度时则抑制生长。 2) Auxin的器官效应: 不同植物器官对Auxin的反应不同,通常根比芽、茎对Auxin更敏感。 ABA抑制生长和种子萌发。 生长素实验: 材料:小麦种子 仪器:温箱、培养皿、移液管、直尺、滤纸、镊子、铅笔 药品:10 mg/L NAA,0.1%升汞 ABA实验: 材料:油菜种子 仪器:培养皿、滤纸、镊子、移液管、铅笔、烧杯 药品:ABA 母液( 0.1 mM ABA )、 0.1%升汞 实验步骤 NAA实验: 1)配置浓度梯度:取洁净大皿5套,编号。在1号皿中加入10 mg/L萘乙酸(NAA) 1ml,加9 ml蒸馏水混匀后即成为1 mg/L 萘乙酸溶液。然后从其中吸取1 ml放入2号皿中,加9 ml蒸馏水混匀后即成为0.1 mg/L 萘乙酸溶液。如此依次稀释到4号皿(最后从第4号培养皿中取出1ml弃去),第5号皿则加入9ml蒸馏水作对照。 2)排种子:在各皿中放入一张与皿底大小一致的滤纸,选取已萌动的小麦种子10粒,用镊子将其整齐地排在皿直径上(腹沟朝下),盖上皿盖后,放在22℃的温箱中暗培养2d。 3) 测量:小麦幼芽长度,幼根数目及最长根长。 ABA实验: 1)配置浓度梯度:取洁净小皿5套,编号。在1号培养皿中加入ABA母液(0.1 mM)2 ml,然后从其中吸取0.2 ml放入2号培养皿中,加1.8 ml蒸馏水混匀后即成为0.01 mM 。如此依次稀释到4号皿(最后从第4号皿中取0.2 ml弃去),第5号皿中则加入1.8 ml蒸馏水作对照。 2)排种子:在各皿中放入一张与皿底大小一致的滤纸,选取油菜籽20粒,放入皿中后用镊子种子分布均匀,盖上皿盖后,放在22℃的温箱中暗培养2d。 3) 统计:发芽率。 分析: 1)NAA的浓度效应 2)不同器官对NAA的敏感性 1)统计发芽率:种子见绿或见白,胚芽(根)种子半径。 2)作图:以ABA浓度负对数为横座标,以相对发芽率(设对照发芽率为100%)为纵座标,绘出标准曲线,分析不同浓度的脱落酸对种子发芽率的影响。 洁净的培养皿 选用活力一致的种子 制作浓度梯度时,摇匀后再取,由高到低稀 释,注意润洗移液管 平铺吸水纸 实际试验时务必设置重复 携带调查用直尺\纸笔 调查后洗净培养皿\反置 如何准备ABA母液? * * 1. 实验目的 了解Auxin和ABA的生理效应 了解不同器官对植物激素敏感性的差异 2. 实验原理 不同浓度的生长素对根部的影响 10-11 10-9 10-7 10-5 10-3 10-1 Auxin浓度(mol/L) 不同营养器官对不同浓度IAA的反应 10-4 根 茎 芽 10-10 10-8 ABA对种子萌发的抑制作用 ABA对气孔的影响 3. 材料、仪器设备与试剂 4. 实验步骤 NAA实验 1)配置浓度梯度:取洁净大皿5套,编号。在1号皿中加入10 mg/L萘乙酸(NAA) 1ml,加9 ml蒸馏水混匀后即成为1 mg/L 萘乙酸溶液。然后从其中吸取1 ml放入2号皿中,加9 ml蒸馏水混匀后即成为0.1 mg/L 萘乙酸溶液。如此依次稀释到4号皿(最后从第4号培养皿中取出1ml弃去),第5号皿则加入9ml蒸馏水作对照。 2)排种子:在各皿中放入一张与皿底大小一致的滤纸,选取已萌动的小麦种子10粒,用镊子将其整齐地排在皿直径上(腹沟朝下),盖上皿盖后,放在25℃的温箱中暗培养2d。 3) 测量:小麦幼芽长度,幼根数目及最长根长。 ABA实验 1)配置浓度梯度:取洁净小皿5套,编号。在1号培养皿中加入ABA母液(0.1 mM)2 ml,然后从其中吸取0.2 ml放入2号培养皿中,加1.8 ml蒸馏水混匀后即成为0.01 mM 。如此依次稀释到4号皿(最后从第4号皿中取0.2 ml弃去),第5号皿中则加入1.8 ml蒸馏水作对照。 2)排种子:在各皿中放入一张与皿底大小一致的滤纸,选取油菜籽20粒,放入皿中后用镊子将种子分布均匀,盖上皿盖后,放在25℃的温箱中暗培养2d。 3) 统计:发芽率。 100% 幼根增或减% 平均芽长 (cm) NAA浓度( mg/L ) 培养2d后 0.001 平均根数 (cm) 平均最长根长 (cm) ?100% ? ? ? ? ? 幼芽增或减% 0(CK) 0.01 0.1 1 调查 5. 结果与分析 NAA实验(2d后)
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