基于质谱DNA序列测定进展.pdf

化学通报　2000 年 第 2 期　　　　　 : . . ·20 · h t tp www ch em ist rym ag o rg 基于质谱的D NA 序列测定进展 艹 许崇峰　杨凡原 　岳贵花　卞利萍 ( 复旦大学化学系　上海　200433) 摘　要　对质谱DN A 序列测定的各种技术的原理、进展、面临的困难以及发展的前景作了评述。 关键词　质谱　 序列测定　评述 DN A Abstract　T h is ar t icle g ive s a rev iew on DN A sequ en cing by m a ss sp ect rom et ry , in clu d ing th e p r in , , . cip le s o f M S techn iqu e s an d th eir p rogre ss d ifficu lt ie s an d p er sp ect ive 　 ; ; Key words M a ss sp ect rom et ry DN A sequ en cing R ev iew 1　引言 DN A 序列分析在生物基因学以及遗传病和病毒性疾病的诊断和治疗上具有重要的作用。用质 [ 1 ] 谱化学方法进行DN A 序列分析是一种新兴的技术。San ger 双脱氧链终止序列测定方法 是常规 的DN A 序列分析方法, San ger 产物需要通过凝胶分离和显色来得到DN A 的序列信息。而当采用 质谱( ) 时, 产物可不需分离而直接测定, 因而质谱方法具有快速性的优点。80 年代中后 M S San ger 期相继出现的质谱离子化新技术电喷雾( ) 和基体辅助激光解析电离( ) 使得用质谱进行 E S I M A LD I DN A 序列测定成为可能。但是由于技术尚不成熟, 目前使用质谱方法仅能测定含几十个碱基的寡 聚核苷酸。要使质谱在人类基因工程(H GP ) 和临床分析中得到广泛的应用, 质谱技术和质谱方法 必须得到显著改善。 2　生物质谱方法 生物质谱, 有别于传统质谱, 测定的对象是分子量可高达几万至几十万的生物分子, 这使得传 统的电子轰击(E I) 、化学电离(C I) 等电离技术的应用受到了极大的限制。随着快原子轰击(FA B ) 、 、 、离喷雾( ) 、大气压下碰撞电离( ) 等电离技术的出现, 大大提高了质谱的测定 M A LD I E S I IS A PC I ( ) 范围。特别是 和 显示了在生物大分子分析 如蛋白质和核酸 上的巨大潜力。 E S I M