功能化微流控细胞芯片的构建及初步应用-第三军医大学学报.DOC

功能化微流控细胞芯片的构建及初步应用 张莉1 张惠静1 管潇1 曹文轩1 赖梦君2 （第三军医大学医学检验系分析化学教研室，重庆 400038） RGD肽共价连接在芯片微通道表面，通过与细胞膜表面整合素家族的特异性识别，促进细胞的粘附与贴壁生长；考察不同浓度RGD的功能化效果。结果 化学交联法能将RGD有效的固定在芯片微通道表面，形成均匀一致的RGD层。获得的功能化细胞芯片具有良好的生物相容性，在无CO2的室温条件下实现的培养 关键词：微流控；； Construction and Application of a Functional Microfluidic Cell Chip Zhang Li1，Zhang Huijing1，Guan Xiao1，Cao Wenxuan1，Lai Mengjun2（1Department of Analytical Chemistry，ollege of Laboratory Medicine，hird Military Medical University，hongqing，400038，P.R.hina；2Chemistry and Chemical Engineering College；Chongqing University, Chongqing , 400030, P.R.China）Through specific identification between RGD and membrane integrin, cells could be successfully adhere to microchannel surface. The functionalization under different concentration of RGD were evaluated. Results RGD peptide was attached on the microchannel surface effectively and uniformly through chemical crosslinking. Cells could survive up to 12 hours in the microchannel at room temperature without CO2 because of the good biocompatibility of functional chip. Conclusion Surface modification enable the RGD peptide link to microchannel surface and maintain its activity, and benefit to the cells adherent culture. Key Words: microfluidic chip, polydimethylsiloxane(PDMS), bio-functionalization, cell culture 基金项目：重庆市科技攻关重点项目（CSTC，2009AB5198），重庆市自然科学基金（CSTC，2008BB5292） 作者简介：张莉（1971-），女，重庆市人，博士，副教授，主要从事生物分析化学研究。电话：（023通讯作者：张惠静，电话：（023Supported by the Key Technologies RD Project of Chongqing（CSTC，2009AB5198）and the National Natural Science Foundation of Chongqing（CSTC，2008BB5292） Corresponding author: Zhang Huijing, Tel:（023）6875230 由于微流控芯片通道的几何尺寸（几十微米–几百微米与细胞，有效地模拟环境，微流控细胞研究越来越受到人们的重视如何在芯片内维持细胞活性是。目前，已出现了多种能够长时间细胞培养的微芯片系统，这些细胞芯片采用机械微结构（如环形坝）来固定细胞，结构复杂，对微机械加工技术要求高，造价昂贵。因此，本研究用生物功能化的方式，将纤蛋白的有效识别单元RGD肽作为功能化的目标物，通过固定于微通道表面，生物分子间的增加细胞的附，细胞简单。 1.1 主要材料 Sylgard 184型PDMS预聚体及固化剂（Dow Corning Corp.，美国）。RGD（），使用时用pH6.0 MES缓冲液10 mg·L-1的RGD工作液。1H,1H,2H,2H- perfluorodecyltriohlorosilane（perfluoro，Flu