因工程与基因组学.pptVIP

第九章 基因工程与基因组学 第一节 基因工程 概念：利用DNA重组技术，把一个细胞中的基因转移到另一个细胞中，并使该基因控制的性状能够正确表达，这项技术称基因工程（gene engineering). 细菌的接合： 1.原理： 噬菌体转导 U形（戴维斯）管实验： 1950年，Davis,B设计， A: trp- his+ B: trp+ his- 混合培养后，10-7细胞 得到100个trp+ his+ 。 没有接合，怎么而来？ 研究结果： 是一种温和型噬菌体（P22）携带的结果。 噬菌体：称可过滤因子。 概念：以噬菌体为媒介，把一个细菌的基因导入另一细菌，这一过程称转导（transduction). 烈性噬菌体：T2, T4 温和型噬菌体：λ , P1, P22 亮氨酸转导 这就是天然基因工程（基因转移）过程! 2. 几个概念： 供体（donor)：品系甲，提供基因； 受体（recepter)：品系乙，接受基因； 目的基因（target gene)：被转移的基因，亮氨酸； 载体(vecter)：噬菌体，携带基因； DNA重组（recombination)：噬菌体插入大肠杆菌的过程，目的基因与载体结合； 几个概念2 限制性内切核酸酶（restriction endonucleases)和连接酶：DNA切开与连接； 感染（infection)： 载体进入受体的一种方式； 转化、转导等。 基因繁殖且表达。 3. 基因工程的主要步骤： ①. 目的基因获得： ⑴ 物理分离法； ⑵化学合成法； ⑶酶切（鸟枪射击）法； ⑷ 逆转录法； ⑸ 噬菌体摄取法； ⑹基因组克隆法等 ②. 载体与DNA重组 ⑴合适载体；质粒、噬菌体、转座子等 ⑵限制性内切酶； ⑶连接酶； 重组1 重组2 ③内切酶 ④ 把重组DNA分子送入受体： ⑴转化： ⑵转导； ⑶基因枪 ⑷注射； ⑸其它一切介导方法。 转化 注射 电激 基因枪 脂质体示意图 脂质体 4. 基因工程的成就： 1.三大支柱：干扰素、人的脑激素、胰岛素 2. 人的抗凝血因子转到羊身上； 3. 抗虫：Bt基因、胰蛋白酶基因、 4. 抗病：抗病毒基因 5. 基因工程要做些什么？ 1. 固N； 2. 大豆蛋白基因转到水稻中； 3. 动物蛋白基因转到植物中； 4. 疫苗抗原转到植物中； 5. 新的抗病虫基因转到新品种上； 6. 大象的生长基因转到猪身上； 7. 观赏新类型；等等 第二节 基因组学 概念：研究生物体全基因组的分子结构和遗传功能的学科称基因组学（genomics)。 结构基因组学（structural genomics)：以分析测定基因组核苷酸序列为主要目的的基因组研究； 功能基因组学（functional genomics)：研究全基因组的基因及其功能，又叫后基因组学（post-genomics)。 基因组计划（genome project)： 研究一个基因组的全部工作的规划： 1.测定全部DNA序列； 2.构建基因组的物理图谱； 3.构建基因组的遗传图谱； 4.构建基因组的转录图谱； 5.分析基因组的功能。 目前实施的基因组计划： 微生物：大肠杆菌、噬菌体、酵母 植物：拟南芥、水稻； 动物：果蝇、猪、牛、鸡等； 人。 例：人类基因组计划（HGP, human genome project） 1986.3.7 美国一个叫dulbecco在Science 上发表一篇文章：“肿瘤研究的一个转折点：人类基因组的全序列分析”。人有3×10 9 bp，工作是浩瀚的。 1990年，美国国立卫生院对“人类基因组计划”立项，拨款30亿美元。 2000年，完成人的基因组草图，完成结构基因组学。 2005年，完成功能基因组学。 HGP的目标 1. Generate sets of full-length cDNA clones and sequences that represent human genes and model organisms. （分析出代表人类全部基因和模式生物的全长cDNA克隆和序列）。 2. Support research on methods for studying functions of nonprotein-coding sequences（产生一种方法用来研究非蛋白编码序列的功能）。 3. Develop technology for comprehensive analysis of gene expression（研究一些技术用来理解和分析基因的表达）。 4. Improve methods for genome-wide mutagenesis（研究一些技术用来研究