网织红细胞计数.docVIP

网织红细胞计数 1．项目名称 网织红细胞计数 检验目的 2．1观察贫血疗效 2．2骨髓移植后监测骨髓造血恢复 2．3其他疾病协诊等 临床实验室 3．检验原理：网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质，甲蓝活体染色后，其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质，经煌焦油蓝或新亚呈浅蓝或深蓝色的网状结构。 4．性能参数 4．1重复性 4．2分析和计算参数：百分比（%） 4．3样本量：染液量=1：1 4．4精密度 5．原始样品系统： 全血 6．容器和添加剂类型 容器采用真空负压专用抗凝管，添加剂类型为0.109M乙二胺四乙酸钾 7．试及显微镜 7．1 10G/L新亚甲蓝（或煌焦油蓝）生理盐水溶液： 新亚甲蓝 1.0G 枸橼酸钠 0.4G 氯化钠 0.85G 溶于双蒸馏水100ML中，混匀，过滤后备用。 7．2 显微镜 7．2．1 商标 8．校准程序:显微镜的验证，光路系统校正 灯泡大约半年更换一次 9．程序步骤： 9．1标本采集与要求 9．1．1标本采集： 抽取静脉血1.8ml，加入到含有乙二胺四乙酸钾溶液的抗凝真空试管中，并轻轻颠倒10次使之充分混匀，不得有凝块、不得形成泡沫，总量不得超过2.0±0.2ml，并在试管上做好标识。采血应避免溶血，采血后2小时内送到检验科，需要运输时应在低温条件下运输。采集标本时宜“一针见血”,以防止组织损伤。 9．1．2不合格标本的处理 对凝固、有凝块、采血量不符合要求、无条码或无标识等不合格的标本,距采集时间超过2小时并且没有按要求储存的标本,按程序文件《样品核收、登记和保存程序》处理 9．1．3标本保存 检测应在标本采集后2小时内完成,2～8℃保存不超过4小时,分析后的标本保存三天。 9．2检验前准备 9．2．1把接收到的标本按顺序编写序号。 9．2．2准备清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片、盖玻片、毛细管，玻璃笔。 9．3病人标本的检验 9．3．1取小试管1支加10G/L新亚甲蓝盐水溶液2滴。 9．3．2加入末梢血（或EDTA钾抗凝静脉血）2滴于上述试管中，混匀。 9．3．3室温下放置10~15MIN后，取1滴制成薄片。 9．3．4油镜下至少计数1000个红细胞中网织红细胞数。 9．3．5计算 网织红细胞百分数=计数1000个红细胞中的网织红细胞数/1000 网织红细胞绝对数（个/L）=网织红细胞百分比数*红细胞数/L 【注意】 活体染色时间不能过短。室温低时，放37摄氏度恒温箱。 最好制两张片，每张计数1000个红细胞，避免分布不均引起的误差。涂片要薄而均匀，不使红细胞重叠。 为计数方便，可于目镜中放一中间有孔硬纸，缩小视野便于计数。 试剂应定期重配，以免变质沉淀。 染液与血液比例约为1：1，严重贫血时可适量增加血液的比例。 10．质量控制 10．1显微镜法 网织红细胞目视激计数误差较大，影响因素主要有：操作人对网织红细胞认识不同；血涂片的好坏；计数红细胞数量的多少和计数方法等。 10．2仪器法 岁可计数红细胞10000~50000个，但如存在Howell-Jolly小体、有核红细胞、巨血小板，则可见假阳性。 11．干扰 12．参考区间 网织红细胞百分数 成人： 0.005~0.015 新生儿： 0.03~0.06 儿童： 0.005~0.015 网织红细胞绝对数： 成人： （24~84）*10*9/L 13．实验室解释： 13．1判断骨髓红细胞造血情况 13．1．1网织红细胞增多：表示骨髓红细胞生成旺盛。常见于：1.溶血性贫血，溶血时由于大量网织红细胞进入血液循环，RET可增至6%~8%或以上，急性溶血时，可达到20%左右，严重者可在50%以上，绝对值常超过100*10*9/L。急性失血后5~10D网织红细胞达到高峰，2周后恢复正常。2.放射治疗和化学治疗后，造血恢复时，可见RET短暂和迅速增高，是表明检测幼稚RET的变化骨髓恢复较敏感的指标。3.红系无效造血时，骨髓检查表明红系增生活跃，而外周网织红细胞计数正常或仅轻度高。 13．1．2网织红细胞减少：见于再生障碍性贫血、溶血性贫血再障危象时。典型的再生障碍性贫血网织红细胞计数低于0.005，网织红细胞绝对值低于15*10*9/L,为诊断其标准之一。 13．2观察贫血疗效 缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血治疗过程中，如RET增高，表明治疗有效，说明骨髓增生功能良好；如RET不增高，则表明治疗无效，并提示有骨髓造血功能障碍，