第四章生物碱研究.ppt

四、提取分离（一）提取 1.酸水提取法：冷提法（渗漉法、冷浸法） 酸性水——0.1% ~ 1%H2SO4、HCl、HOAc等 生药 H+/H2O 药渣 Alk ? OH-/H2O H+/H2O OH- 弱碱及杂质 亲水性Alk 四、提取分离（一）提取 1.酸水提取法 此法缺点： 提取液体积较大（浓缩困难） 提取液中水溶性杂质多 解决方法： （1）离子交换树脂法 （2）沉淀法 四、提取分离（一）提取 2.醇类溶剂提取法 生 药 H+ / H2O 药 渣 醇 液 OH-/H2O 醇或酸性醇 挥醇；加酸水 碱性较弱的碱 亲水性Alk CHCl3 沉 淀 Alk OH-/H2O CHCl3 四、提取分离（一）提取 3.与水不相混溶的有机溶剂提取法 生 药 残 渣 CHCl3 CHCl3 H+/H2O 碱化（如NH4OH）（使Alk游离） 渗滤（或浸渍）（如CHCl3等） H+/H2O OH-/H2O Alk沉淀 亲水性Alk 碱性较弱的Alk 四、提取分离 （一）提取 1.酸水提取法 2.醇类溶剂提取法 3.与水不相混溶的有机溶剂提取法 （二）分离 溶解性——重结晶法、沉淀法 碱性强弱——pH梯度萃取 色谱法 苦参碱和氧化苦参碱混合物 苦参碱 氧化苦参碱 少量CHCl3溶解 CHCl3 液 加入10倍量的乙醚 沉淀 （氧化苦参碱） 母液 （苦参碱） 四、提取分离（二）分离 1.根据Alk及其盐的溶解度不同进行分离 四、提取分离（二）分离 2.根据Alk的碱性差异进行分离 总生物碱浓缩物 酸水溶解 酸水液（生物碱盐） CHCl3溶解 CHCl3溶液(游离生物碱) 用不同酸度 (酸度由弱到强 , pH由大到小)的酸水进行梯 度萃取,酸水液分别碱化,同 时CHCl3萃取,回收CHCl3 生物碱由强到弱依次被分离 加碱(pH 由小到大) 进行梯度萃取、碱 化,同时用CHCl3萃 取，分别回收CHCl3 生物碱由弱到强依次被分离 四、提取分离（二）分离 3.色谱法 ⑴吸附剂：柱色谱法常用氧化铝（偶用硅胶）； ⑵展开剂：游离Alk常以苯、乙醚、氯仿等溶剂洗脱 ⑶化合物极性判断： ①相似结构：双键多、含氧官能团多——则极性大 ②在含氧官能团中： 四、提取分离（二）分离 4.利用生物碱分子中特殊官能团的性质进行分离 含羧基的生物碱----可用碳酸氢钠水溶液萃取 分离。 含酚羟基的生物碱----可用氢氧化钠水溶液萃取分离 （吗啡和可待因）。 含内酯或内酰胺结构的生物碱----用热的氢氧化钠开环、加酸环合的性质予以分离(喜树碱)。 吗啡 R=H 可待因 R=CH3 吗啡和可待因混合物 CHCl3溶解 氯仿溶液 1~2% NaOH溶液萃取 碱水液 CHCl3液 弱酸酸化 CHCl3萃取 回收溶剂 可待因 CHCl3液 吗 啡 回收溶剂 本 章 内 容 ? 五、结构鉴定 （一）色谱法 测定理化常数（如：熔点），与文献报道的数据进行对照，与对照品共薄层，测定其衍生物的理化数据等。 1.薄层色谱法 2.纸色谱法 五、结构鉴定 （二）四大光谱 紫外光谱、红外光谱、质谱、核磁共振 UV——反映分子中所含共轭系统情况； IR——利用特征吸收峰，鉴定结构中主要官能团； NMR——各种技术图谱测定结构； MS——依据文献，结合主要生物碱类型的质谱特征进行解析。 毒藜碱其紫外光谱吸收峰 261nm与吡啶吸收峰相似。说明若是吡啶的衍生物，分子中取代基与吡啶母核不存在共轭效应，否则吸收峰会发生变化。因此推测很可能是吡啶的衍生物。红外光谱?max1598，1586，1484cm-1亦反映这种推测。 利血平分子式为C33H40O9N2，通过红外吸收光谱，示其分子中含有-NH-（3484 cm-1），两种不同的羰基（1580 和1499 cm-1），芳烃基（1153 及1031 cm-1）和6-甲氧基吲哚基（1613 cm-1）等而其紫外吸收光谱 215nm、267nm、295nm，也示其分子中有