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第十二章 发酵的中间控制 重点:温度控制;发酵热;温度对发酵的影响; pH值的控制;pH值对菌生长和代谢产物形成的影响;影响pH变化的因素;发酵过程中pH的调节及控制;泡沫的控制;发酵过程中泡沫的变化;补料的控制; 发酵的中间控制的项目包括:温度控制、pH控制、泡沫控制、补料控制。 第一节 温度控制 一、发酵热 伴随发酵的进行而产生的热量叫发酵热;发酵热的产生引起发酵液温度变化。在发酵过程中,某些因素导致热量的产生,另外一些因素又导致热量散失。如果在过程中,产生的热量大于散失的热量,则有净热量堆积,这时发酵液的温度将上升;相反,产热小于耗热,则温度将下降;下面具体分析产热和散热的因素。 产热的情况: 生物热:有氧呼吸的最高效率(贮能、转换成ATP高能键)约为42%,厌氧发酵如同型乳酸发酵约为27%,表明菌体分解的基质中的能量,大部分是以热能的形式散失到环境中,用Q生物表示。 摩擦热:通风搅拌过程中,发酵液之间、发酵液与搅拌器及罐壁之间均有摩擦,由此产生的热量称为摩擦热,用Q搅拌表示,Q搅拌=P × 3061 散热的情况: 蒸发热:空气经发酵液时,发酵液中有部分水汽化,变成水蒸气,随空气一起排出罐外,这部分水汽化时带走的热量用Q蒸发表示,假设进出口气体温度相同,则由通气带走的热量为:Q蒸发=G(I出-I进),G:空气流量;I:气体热焓; 辐射热:通过罐体表面向环境中发射红外线而散失的热量。热量的大小决定于罐内外温度差大小、罐的表面积等。 发酵过程中,发酵液温度变化取决于上面几个因素: Q发酵 = Q生物 + Q搅拌 - Q蒸发 - Q辐射 二、发酵热的测量及计算 发酵热的测定可采用以下几种方法: ①利用热交换原理,测量一定时间内冷却水的流量和冷却水进出口温度,根据 Q发酵 = G*C(t2 – t1)/V ②利用温度变化率S(℃/h):先使罐温恒定,再关闭自控装置,测量S,根据 Q发酵 = (M1*C1 + M2*C2)S ③热力学方法: 根据盖斯定律:“在恒压和横容条件下,一个反应不论是一步完成或几步完成,其反应热是相同的”。这实际上是热力学第一定律的必然推论,因为焓(H)是状态函数,过程的焓变与途径无关,只决定于过程的始态和终态。发酵热可根据标准燃烧热或标准生成热来计算。 计算时,首先查出发酵所用的各种原料及产物的标准生成热或燃烧热,再根据实际发酵中,各原料的消耗及产物的生成量,利用上述公式即可求出过程的焓变。 三、温度对微生物生长的影响 任何微生物的生长温度均在一定范围内,可用最高温度、最适温度和最低生长温度进行描述;温度对微生物的影响主要从以下几个方面来影响微生物:酶活性、膜的通透性以及影响细胞内各种反应的速率; 不同微生物生长的温度范围宽窄不同;同一微生物在其生长和产物积累阶段的温度要求也不同,因此,工业发酵上常采用阶段温度控制来进行发酵。 温度对微生物生长的影响,在其他条件如pH、环境溶液的离子强度变化时,变化也较大,是他们协同综合作用的结果。 四、温度对发酵的影响 既然温度对微生物的生长活动影响很大,当然在发酵生产上就成为一个过程控制的参数。 酶学方面:在一定温度范围内,温度升高,反应速率加大,有利于菌体生长和产物积累,但菌体的衰退也加快,菌体对氧的消耗相应加快,而温度升高时,氧的溶解度下降,所以应综合考虑。 产物方面:温度能影响菌体分泌的产物种类及酶系。用米曲霉制曲时,如温度在低限时,得到蛋白酶,此时α-淀粉酶的合成受到抑制。又如用凝结芽孢杆菌合成α-淀粉酶时,发酵温度控制在55℃时,合成的α-淀粉酶较耐高温,在90℃、60min条件下,其活性丧失仅10%左右,而发酵温度控制在35℃时,合成的α-淀粉酶在相同条件下丧失90%。 菌体特性方面:同种菌体在生长和产物积累阶段所要求的温度往往有差别,多数情况下是最适生长温度比产物积累的最适温度要略高些。 五、最适温度的控制 由于微生物在生长和发酵过程中,对温度有以上要求,在生产上,为获得较高的生产率,针对所用菌种的特性,在发酵周期的各阶段需要进行温度控制,提供该阶段微生物活动的最适温度。 如用产黄青霉进行青霉素的发酵过程中,根据不同生理代谢过程的温度特点,而采用四段控制其发酵温度:30℃起始发酵5h→25℃40h→20℃125h→25℃165h→放罐。该法其青霉素产量比自始至终进行30℃恒温发酵培养的对照组提高了14.7%。 第二节
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