新生鼠高氧肺损伤nfκb、tnfα和il8表达的动态变化.pdfVIP

新生鼠高氧肺损伤NF．KB、TNFa和IL．8表达的动态变化 材料与方法 1．研究对象 新生昆明小鼠80只(10窝，每窝8只)。 2．动物模型的建立及动物分组 新生小鼠随机分为实验组与对照组，每组为 5窝。实验组将新生昆明小鼠置于密闭箱中持续输入氧气，维持 及更换垫料：对照组：Fi02=O．21，温度、湿度控制同实验组。 3．标本采集及处理每组小鼠分别于实验后的l、3、7、14、21天处死，取左 肺置于10％福尔马林中固定，制备石蜡切片，右肺制备肺组织匀浆，离心后取 上清待测。 4． 实验方法及检测指标 石蜡切片HE染色光镜下观察肺组织病理形态学变 织IL．8。 5统计学分析 所有实验数据以均数土标准差表示，采用SPSSl 1．5软件包进行 统计学分析，两组间比较采用独立样本t检验，多组问比较聚用单因素方差分析， 显著性水平为Q=0．05。 结果 1．肺组织的病理改变 对照组出生后肺泡上皮自不规则结构逐渐发育成熟 至21天肺泡结构规整，肺泡大小均匀一致，肺泡间隔变薄。实验组1天表现为肺泡 样结构不规则，肺泡腔较小，肺泡间隔较厚，与对照组无明显差另Jl；3天时肺泡结构 逐渐规整，大小较均匀，肺泡间隔变薄，肺泡腔内及肺泡间隔有少许炎性细胞渗 出；7天时肺泡腔增大，肺泡间隔较薄，14天时肺泡腔明显增大，肺泡数量减少，21天 时正常肺泡结构消失，数量明显减少，肺泡腔直径明显增大，肺泡间隔菲薄，局部肺 问质细胞增加。 lI 新生鼠高氧肺损伤NF—KB、TNFq和IL一8表达的动态变化 组织呈阴性或弱阳性反应，部分胞浆呈浅染色，偶见胞核着色；实验组与对照组 相比，各时间点均呈强阳性反应，阳性反应产物不仅分布于阳性细胞的胞浆中， 细胞核中也呈强阳性反应，表达分布更广泛，NF．vd3p65蛋白在实验组各个时间 点表达水平不同，实验组1天时NF．r,．Bp65蛋白表达阳性率为(3．085：0．38)％， 高于对照组的(2．735：0．42)％，但差异没有统计学意义(DO．05)。实验组在3天、 14天表达水平最高，其次为3天。实验组3天、7天、14天、21天分别与实验 组1天比较差异均具有统计学意义(p0．05)。 3．肺组织TNFa的表达：免疫组化显示TNFot蛋白在对照组小鼠肺组织呈阴 性或弱阳性反应；实验组与对照组相比，各时间点均呈强阳性反应，表达分布广 泛。对照组均呈低水平表达，1天、3天、7天、14天、2l天分别为：f3．03±O．51)％、 ±1．41)％，至21天为(16．83±O．89)％，仍高于对照组，未能完全恢复正常。实验 组3天、7天、14天、2l天分别与实验组1天比较TNFct的表达均具有显著性 差异(p0．05)。 4，肺组织IL．8的表达：实验组肺组织IL．8水平均高于对照组，实验组1 计学意义(p0．05)；随吸氧时间延长，实验组肺组织IL_8水平进行性升高并一 7天、14天、21天分别与实验组1天比较IL．8的表达均具有显著性差异(pO．05)。 IlI 新生鼠高氧肺损伤NF·KB、TNFct和IL一8表达的动态变化 结论 1．本研究建立的新生鼠高氧肺损伤模型是成功的， 高氧可造成新生鼠肺 组织明显的病理损伤，随着吸氧时间的延长，其病理损伤逐渐加重。 2．高氧暴露后新生鼠肺组织NF．r．B活化并持续表达，提示NF．1(B活化在高 氧肺损伤的发生、发展中起作用。 3．高氧暴露早期n师n随暴露时间的延长而增加，继续暴露时则逐渐降低， 提示TNFa主要在早期的急性炎症阶段起作用，而在后期的纤维化病变中 所起的单独作用相对较弱。 4．IL．8的水平升高贯穿于高氧暴露的病程中，提示IL一8参与高氧肺损伤的 急慢性病变。 关键词：NF—KBTNFaIL一8 新生鼠 高氧肺损伤 V 新生鼠高氧肺损伤NF-rB、TNh和IL．8表达的动态变化 The of nuclearfactor-KB、tumornec