仪器分析在花色苷中应用.pptVIP

仪器分析方法在花色苷研究中的应用;绪言;1 花色研究概况;影响花色形成的主要因素;;2 花色苷的化学结构和性质;渡迁伐袱狼铅窟秩毋茨膨从叮滇烛听范士哲启偏物籍猛愚孽汗鸭溅援匝惨仪器分析在花色苷中应用仪器分析在花色苷中应用;2.2 影响花色苷颜色稳定性的主要因素 花色苷的酰化作用： 有机酸如ｐ-香豆酸、咖啡酸和琥珀酸等通常与花色苷的3、5、7或3′位上的糖结合,形成单酰、二酰或多酰花色素苷。酰化花色苷参与分子内辅助着色或分子间辅助着色反应，是花色苷在较宽的pH值范围内颜色稳定表现。 pH值的作用： 在溶液介质中,花色苷会随pH有几种结构的变换。对于一个给定的pH值,在花色苷的4种结构之间存在着平衡:蓝色的醌式(脱水)碱、红色的花钅羊正离子、无色的甲醇假碱和查尔酮。 金属离子： 酰化花色素与辅助色素、金属发生反应,形成复合花色素苷。 ;研究的主要对象：羟基的位置和数量、糖的类型及位置、酰基化作用、取代基等 研究的主要方法：光谱法－－紫外可见光谱、红外吸收光谱，色谱法，核磁共振波谱法，质谱法;3.1 光谱法;③根据花色苷最大吸收波长处的吸光度和440nm处的吸光度的比值Ａ440/Ａmax，参考文献后，可以判断糖苷的位置。 ④根据花色苷在300～330nm间有无吸收峰可判断该色素分子是否有酰基，如果有吸收峰，表明该色素有酰基存在。 ⑤根据花色苷在440nm处是否有肩峰，可以判断该色素5号位的羟基是否被取代。如果5号位的羟基没有被取代，则该色素在440nm处有肩峰。 ⑥根据花色苷在紫外光下是否有荧光，可判断该色素是否在5号位有取代基，如果有荧光则表明该色素在5号位有取代基。 ; 3.1.2 红外吸收光谱 目前,红外吸收光谱应用于花色苷的结构鉴定不太广泛。花色苷的红外光谱主要有苯环、含氧杂环、糖和羟基和甲氧基四部分。 其中杂环的C＝O键的吸收峰在1630-1620cm-1，苯环和杂环的C一C键有三个吸收峰：Ⅰ：1605-1580cm-1，Ⅱ ：1577-1565cm-1，Ⅲ：1518-1485cm-1 。苯环C-H键的吸收峰在900-800cm-1，4-H:905－885cm-1，6-H:839-848cm-1，8-H:809一830cm-1。B环C-H键的吸收峰位置受取代基影响，不同的苷原也不相同。甲氧基和经基的吸收峰在1120-1010cm-1。花色苷的乙酞化产物的C=O键引起的峰在1654－1695cm-1。;3.2 色谱法;3. 3 核磁共振波谱法;3.4 质谱法;4 花色素苷的定量分析;4.2 含有干扰物质的体系中花色苷总量的测定： 4.2.1 pH示差法：该法依据之一是花色苷发色团的结构转换是pH的函数，依据之二是超干扰作用的褐色降解物的特性不随pH而变化。通过实验，确定两个对花色苷吸光度差别最大但是对花色苷稳定的pH值，根据Fuleki的公式可以计算出花色苷总量。 4.2.2 差减法：差减法就是先测定样品在可见光区最大吸光度，经二氧化硫或亚硫酸盐漂白或过氧化氢氧化后，再测定一次吸光度,二者的差值就是花色苷的吸光度。参考用标准花色苷绘制的工作曲线，将吸光度换算成浓度。但是，差减法因所使用的漂白剂也能降低某些干扰组分的吸光度而使总花色苷浓度偏高。 4.3 单个花色苷的定量： HPLC是广泛使用的方法。;5 其它应用;5.1 花瓣细胞pH值测定;原理：荧光探针强度随pHi升高呈线形变化 主要的荧光探针：SNAFL、BCECF、NERF等 方法：荧光比值法 优点：操作方便、对于细胞损伤小 应用：Asen等人于1975年应用这一方法对二百余种植物的花进行了细胞pH值的测定 ;5.2 颜色的分析;颜色测定实例;6 花色苷国内外研究实例;敷垃埃勾锄肄驼充拇拂苹革客汗疥说时患狄李颅贯呵君毙于耕絮首陀锡泳仪器分析在花色苷中应用仪器分析在花色苷中应用;结束语;主要参考文献：;