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实验六邻二氮菲分光光度法测定铁
实验六 邻二氮菲分光光
度法测定铁
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一、实验目的
1.掌握722型分光光度计的正确操作方法。
2 .掌握刻度吸量管的正确操作方法。
3.掌握用分光度法来测定微量铁的含量的原理与方法。
4.学会制作标准曲线,并利用标准曲线求出未知样品的
浓度。
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二、实验原理
1)标准曲线法:先配制一系列浓度不同的标准溶液,在同一条
件分别测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制A-
C关系曲线,或叫工作曲线。如符合比尔定律,将得到一条通过
原点的直线。从标准曲线上求得样品溶液的浓度。
2 )显色剂邻二氮菲在PH4.5~5的缓冲溶液中与Fe 2+生成稳定的
红色配合物,最大吸收波长在510nm,在含铁量为0.5 ~8mg/L范
围内线性关系良好。符合比尔定律(朗伯比尔定律适用条件:首
先是单色光,还要符合一定范围的低浓度溶液)。
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三、实验步骤
1、标准曲线的绘制
用刻度吸量管分别吸取铁标准液(指含Fe3+25.00ug/ml)0.
00、1.00、2.00、3.00、4.00ml,分别置于5支25ml 的比色管
中+10%盐酸羟胺1ml+1mol/LNaAc 5ml+0.15%邻二氮菲2ml,
用蒸馏水稀释至“上刻线”,摇匀。
准确吸取未知铁样品液3.00ml于6号比色管,以下同上操作。
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2、紫外可见分光光度法测定铁的含量
将上述6支已配制好的溶液,在510nm波长处,用1cm比色
杯,测量各管溶液的吸收度A ,绘制标准曲线。
在标准曲线上查出试液中铁的含量,求出未知铁样品液中
铁的含量。
721型(光栅)分光光度计
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四、注意事项
1.绘制吸收曲线操作时,波长没改变一次,都必须用空白液调节
“0”和“100%”,校正好后在测A/T 。
2. 比色皿装液前,先要用被装液淋洗2-3次。
3. 比色皿装液不能太满,也不能太浅,一般3/4~4/5为宜, 比色
皿的光面置光路中。测定的顺序应按浓度由稀到浓的顺序
依次测定。
4.根据实验数据绘制标准曲线时,一定要在坐标纸上绘制。
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