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真菌学总论贾伟西安医学院附属医院 2008 年 真菌学概述 真菌（fungus），也称Eumycota，来源于拉 丁文的fungus，即蘑菇。真菌属于真核细胞 型微生物，与原核细胞型微生物有很多区别 真菌细胞壁含有甲壳质（chitin）和β-葡聚糖 营养方式为吸收，无吞噬作用，营腐生、寄 生、共生和超寄生生活。 原核细胞型微生物与真核细胞型微生物比较 真菌分类 我国普遍采用的是Ainsworth等分类法， 与医学有关的真菌为真菌门中的四个亚门: ◆接合亚门（zygomycotina） ◆子囊菌亚门（Ascomycotina） ◆担子菌亚门（Basidiomycotina） ◆半知菌亚门（Deutermycotina） 假丝酵母菌属（Candida） 隐球菌属（Cryptococcus） 表皮癣菌属（Epidermophton） 球孢子菌属（Coccidioides） 组织胞浆菌属（Histoplastoma） 真菌生物学性状 真核细胞型微生物，属于真菌界（Kingdom Myceteae）。它具有典型的细胞核，不含叶绿素，以腐生或寄生方式摄取营养，细胞壁含几丁质（Chitin）和（或）纤维素，有完善细胞器，能进行有性生殖和（或）无性繁殖。 真菌生物学性状 多数对人有益，仅少数导致人类疾病 对人致病的真菌分为四类：病原性真菌、 条件致病性真菌、产毒真菌及致癌真菌。 目前大多数真菌的鉴定，形态学（包括真 菌形态、菌落形态）检查仍有重要意义 。 真菌形态特征 单细胞真菌 酵母菌：孢子，无菌丝 类酵母菌：芽生孢子，假菌丝 多细胞真菌 丝状菌（霉菌）：孢子和菌丝 二相型真菌 孢 子 的 分 类 有性孢子：同一/不同菌体上两细胞 融合减数分裂而成 无性孢子：菌丝上细胞分化生成，不 发生细胞融合。 临床标本的采集种类 （1）皮肤的角质性物质：毛发、指（趾） 甲、皮屑等。 （2）各种分泌物和排泄物：生殖道分泌物、 耳垢、痰、粪便、尿液等。 （3）血液和体液：体液包括胸水、腹水、脑 脊液、淋巴穿刺液等。 （4）脓汁及渗出物。 采集标本注意事项 （1）采集的标本要适宜 不同真菌感染应采取不同的临床标 本。怀疑为浅部真菌感染如体癣，应刮取病变边缘的痂、皮屑，发癣应取折断了的病发。怀疑为深部真菌感染应取血液、脑脊液、痰、脓汁等。 （2）在用药前采集标本　一般真菌标本须在用药前采集，对已用药者则需停药一段时间后再采集标本。 采集标本注意事项 （3）采集的标本量要足 血液和脑脊液标本5ml，胸腔液20ml，皮屑标本两块，活体组织两份（一份送病理科检查，一份作镜检和培养）。 （4）严格无菌操作　在采集标本时严格无菌操作，并进行消毒处理，尤其是在采集血液和脑脊液标本时，要避免污染杂菌。 （5）采集的标本立即送检　对采集的标本应立即送检，特别是深部真菌标本采集后最长不超过2h。 真菌的检验方法 镜检真菌形态 真菌抗原检测 真菌分离培养与鉴定 真菌核酸检测 真菌毒素检测 常用的染色方法 常用的染色方法有革兰染色、瑞氏染色、荧光染色，乳酸酚棉蓝染色、还有墨汁负染色等。 对检测骨髓和外周血中的荚膜组织胞浆菌，需作瑞氏染色或姬氏染色后镜检。 检测病人脑脊液标本中新生隐球菌，需作墨汁负染色后检查，背景为黑色，新生隐球菌和荚膜不着色 直接镜检意义 阳性结果意义 1.有诊断意义，如浅部真菌病、隐球菌病、皮肤粘膜假丝酵母菌病等 2.代表组织相，直接镜检看到的真菌形态就是该真菌的组织形态，如假丝酵母的菌丝、浅部真菌的厚膜孢子等；确定某些致病性真菌属或种，如皮肤癣菌、曲霉等 3.判断某些真菌种的致病性等 直接镜检意义 直接镜检局限性 1.阴性结果不能排除真菌感染，直接镜检不如培养敏感，其敏感性随标本类型、数量、采集时间和质量等而有所不同 2.有假阳性结果，如溶解的淋巴细胞在脑脊液印度墨汁湿片中易误认为新生隐球菌；脂肪微滴也可与出芽酵母细胞混淆 分 离 培 养 真菌培养是目前鉴定真菌的唯一方法。 培养成功与否与采集的标本是否适当、是否新鲜、培养基的选择、培养温度与时间等有关。 大多数真菌培养的温度为28℃，但深部真菌为37℃。对二相性真菌培养时,28℃培养真菌呈菌丝相（霉菌型），37℃培养为组织相（酵母型）。 真菌培养方法 平皿培养 :表面较大可使标本散布，便于观察菌落形态，但水分易蒸发，只能培养生长繁殖较快的真菌，如假丝酵母菌、隐球菌。 大试管培养:水分不易蒸发，主要用于皮肤癣菌的培养和真菌菌种的保存。 玻片培养(微量培养、小培养):可用于真菌菌种的鉴定。