1第一章实验室设备和一般技术.ppt

1 通用实验室 准备室（又称化学实验室），明亮，通风。 功能——洗涤室、配置室、灭菌室 注意事项： ①对高压灭菌后不变质的物品，如无菌水、栽培介质、接种用具，可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间，既要保压彻底，又要防止培养基中的成分变质或效力降低，不能随意延长时间； ②对于一些布制品，如实验服、口罩等也可用高压灭菌。洗净晾干后用耐高压塑料袋装好，高压灭菌20-30min； ③高压灭菌前后的培养基，其pH值下降0.2-0.3单位。因此，调pH值时，可适当调高0.1－0.3个单位。 3 培养设备空调定时器温度控制器增湿机或去湿机培养架摇床或旋转床日光灯光照培养箱 4 化学实验及分析设备 天平 酸度计 蒸馏水器 烘箱或玻璃烘干器 电炉 药品柜 冰箱 水槽 凉干架 污物桶 5 培养物细胞学观察设备 显微观察设备 组织切片染色设备 照相及冲洗设备 第三节 玻璃器皿的选择和清洗 1 玻璃器皿的选择 2 清洗 （1）试管--- 适合于初代培养、用少量培养基及试验各种不同配方时选用 （2）三角锥瓶— 适用于各种培养（如固体培养、液体培养、大规模培养或一般培养）。 （3）L形管和T形管— 为专用的旋转式液体培养试管。 （4）培养皿— 适于作单细胞的固体平板培养、胚和花药培养和无菌发芽。 （5）角形培养瓶和圆形培养瓶— 适用于液体培养用，如单细胞和原生质体的浅层培养。 （6）果酱瓶— 常用作组培苗大量繁殖用的培养瓶。 （7）兰花瓶—适于蝴蝶兰、大花蕙花等兰花的组培苗大量繁殖用的培养瓶。 三角瓶：50、100、250、500ml或用250ml罐头瓶代替，2000-3000ml。 培养皿：6、9、12cm 试管：18×180mm或20×200mm 量筒：10、50、100、500、1000ml 　烧杯：50、100、200、500、1000ml 　容量瓶：100、200、500、1000ml 　试剂瓶（棕色）：50、100、250、500、1000ml 　移液管：0.2、0.5、1.0、2、5、10ml 微量移液器 玻璃棒、酒精灯 2 清洗 2.1.清洗玻璃器皿用的洗涤剂有肥皂、洗洁精、洗衣粉、和铬酸钾洗涤液。 2.2 原则： （1）清洗时先将器皿中的残渣除去，用清水洗净，再用热的肥皂水或洗洁精洗净，清水冲洗干净后用蒸馏水冲洗一次，干后备用 （2）洗净的玻璃器皿应透明发亮、内外壁水膜均匀，不挂水珠。 2.3 新购的玻璃器皿 ①先用1%稀盐酸洗后用洗洁精清洗，用自来水、蒸馏水冲洗。 ②用重铬酸钾+浓硫酸洗液浸泡4h后，自来水彻底冲洗。 2.4用过的玻璃器皿 流水冲洗后，泡入洗洁精水中刷洗，用自来水蒸馏水冲洗 污染瓶清洗： 有可能被病原菌污染的器皿，必须经过适当消毒后，将污垢除去，用皂液洗刷，再用流水冲洗干净。 若用皂液未能洗净的器皿，可用洗液浸泡适当时间后再用清水洗净。 洗液成份是重铬酸钾和浓流酸，能将有机物氧化成可溶性物质，以便冲洗。洗液有很强的腐蚀作用，使用时应特别小心，避免溅到衣服、身体和其他物品上。 第一章 实验设备及培养条件 第一节 实验室设计 第二节 常用设备和器材 第三节 玻璃器皿的选择与清洗 第二节　设备和器材 1 高压蒸气灭菌锅﹡ 2 接种工具﹡ 3 培养设备﹡ 4 化学实验及分析设备 ﹡ 5 培养物细胞学观察设备﹡ 1. 高压蒸气灭菌锅 用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒。 工作原理：在密闭的蒸锅内，0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸气温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。 1.外桶 2.锅盖 3.安全阀 4.排气阀 5.气压表 6.内桶 7.排气软管 8.支架 手提式高压蒸气灭菌锅 1 高压蒸气灭菌锅 使用方法： 首先检查灭菌锅内是否有水，而且水刚好淹住加热器， 然后放入灭菌材料，对称拧紧灭菌锅上的螺丝，关闭放气阀通电。 待压力上升到0.05MPa时，打开放气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。 三次放气后，关阀再通电，压力表上升达0.1-0.15Mpa时，维持20min后，断电， 待压力降至零时，打开入入气阀，取出灭菌材料。 2.1镊子类：接种、转移材料或分离茎尖用，以100ml三角瓶为培养瓶，可用20cm长。 2 接种用具 2.2 剪刀类：医用剪刀，剪切割外植体或继代培养时分离材料。 2.3 解剖刀：切割芽、茎段、愈伤组织等，继代时分离材料，也可用于微小外植体的接种等。 2.4、解剖针：转移细胞或愈伤组织，微茎尖分离及接种等。 2.5.其它：周转筐 搪瓷盘 移液管架、玻璃棒、酒精灯、试管架等。 倒置显微镜 体视显微镜 生物显微镜 荧光显微镜 1.1 对玻璃