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第一章 绪论; ;A Glimpse of
Plant Tissue Culture;一、基本概念 What Is Tissue Culture? Or in vitro culture? Or micropropagation?;营养器官:根、茎、叶、花、形成层;Characteristics of Plant Tissue Culture Techniques;植物组织培养的理论基础—细胞全能性;植物细胞全能性的表达;植物全能性的表达;; 外植体:由活体植物体上切取下来的,用于组织培养的各种接种材料。包括各种器官、组织、细胞、原生质体等。即能被诱导产生无性增殖系的器官或组织。;组织培养植株再生的途径;胚状体发生途径; 2)、愈伤组织途径
将外植体接种在人工培养基上,由于植物生长调节剂的存在,细胞脱分化形成愈伤组织,然后通过再分化形成再生植株。它是最为常见的。 ;原球茎----主要是兰科植物在诱导时,分化出的原初植物形态,具有完整的植株器官原基,成苗容易。??
胚状??-----由愈伤组织或表面形成的许多类似胚的突起,是初步分化的幼小生命体,芽根有共同的维管束,是双极性结构,起源于单细胞,无嵌合现象,结构完整,可直接形成小植株,成苗率高,去分化难,再分化也很难。??? ; 由愈伤组织或外植体诱导形成芽、根,获得再生植株的方法。;愈伤组织;愈伤组织;外植体;按培养材料分为:;器官培养:
将植物的器官如胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、花和幼果的部分组织接种在无菌培养基上进行培养。;细胞和原生质体培养:
细胞培养是将植物的单个细胞分离出来,并进行培养;
原生质体培养是指将植物细胞的细胞壁通过机械、物理或化学的方法去除,然后再进行培养。;根据培养方式:固体培养、液体培养 固体培养:将培养物放在含有琼脂等固化剂的培养基表面进行培养。 液体培养:将培养物放在未加固化剂的培养基内培养,一般需进行震荡,又称液体 震荡培养。;固体培养法
是最常用的方法。该方法简单,易行,但养分吸收不均,生长速度不均衡,并常有褐化中毒现象发生。
液体培养法
由于液体中氧气含量较少,常用震荡培养的方法以确保氧气的供给
往复式摇床或旋转式摇床进行培养,速度一般为50-200r/min,这种定期浸没的方法,既能使培养基均一,又能保证氧气的供给。 ;根据培养物量的多少:
大量培养、微量培养。
根据培养过程中是否需光:
光培养、暗培养
根据培养方法的不同:
平板培养、微室培养、悬浮培养;; 第二节 植物组织培养技术的发展历史
1、 早期探索阶段 (1930年以前)
1893年,Schwann和Scheiden提出细胞学说及植物细胞全能性理论。
1902年,德国植物生理学家Haberlandt第一次尝试采用植物组织培养技术对小野芝麻、风眼兰叶肉组织及万年青属植物的表皮细胞进行培养,但未能培养成活。
1904年,Hanning首次对十字花科的萝卜和辣根的胚培养成功。
1922年,Knudson将兰花种子在离体的条件下非共生萌发。同年,Knotte和Robbins对离体根尖进行了培养。Robbins还对豌豆、玉米及棉花的茎尖进行了培养,只形成一些缺绿的叶和根。
1925年,Laibach利用胚培养技术对亚麻的种间杂种胚进行了培养,并于1929年利用亚麻的胚培养来克服杂交不亲和性。;2、植物组织培养技术的初步形成(1930-1960年)
1933年,我国植物生理学家李继侗培养银杏胚胎,并发现银杏胚乳提取液可促进离体胚的生长。
1937年,White发现B族维生素对离体根培养的重要性。并指出IAA对植物生长发育的控制起重要作用。
1937、1938年,Gantheret在培养基中加入上述生长因子,使得柳树形成层诱导形成的愈伤组织连续生长。Nobecomt对烟草种间杂种茎段的形成层细胞培养也得到了类似的结果。
1948年,Skoog等通过对烟草茎段和髓培养发现,不定芽和不定根的发生由生长素/腺嘌呤的比例决定。
1950年,Ball从红杉愈伤组织培养中再生获得器官。;1952年,Morel和Martin通过分生组织培养获得大丽花的脱毒植株,同年,首次应用微型嫁接技术。
1953年,Tuleche首次从花粉培养中获得银杏的单倍体愈伤组织。
1955年,Mi
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