Benzonase 核酸酶使用说明书.PDF

Benzonase核酸酶使用说明书 产品及特点 Benzonase是由粘质沙雷氏菌 （Serratiamarcescens）分泌的、由两 个大小为26kD的亚基组成的一种广谱核酸酶，由Benzon公司最先商品化， 故名Benzonase。其活力比DNaseI强34倍，能以相同的效率酶切单联和 双链DNA和RNA，将其消化成3-5碱基长度 （杂交限度以下）的5’-单磷 2+ 酸寡核苷酸。其活性需要Mg ，最佳pH在6-10之间，最适温度在35-44℃。 本产品是在野生型的Benzonase 的基础上经过基因工程改进而得，它具有下 列特点： 1. 微量本产品就能高效降解所有形式 （包括单链，双链，线性和环状） 的DNA和RNA，尤其适合从细胞裂解物中去除核酸，降低样品粘度而不影 响蛋白电泳图谱。 2. 在有变性剂存在的条件下（如4M尿素）还有活性，可以直接加入 很多蛋白裂解液中。 3. 降解核酸完全，符合FDA关于核酸污染的处理规程，可以用于工业 生产。 4. 可以用于蛋白提取、2D凝胶电泳、Western Blot、免疫沉淀等实 验。 规格及成分 成份 500U包装 Benzonase核酸酶 500uL (1U/uL) 使用手册 1份 酶储备液的配方是：50mMTris-HCl pH 8.0， 20mMNaCl， 2mMMgCl ，50%甘油。 2 酶单位定义：在标准反应体系内30分钟内使 OD260改变 1.0的酶量，相当于彻底降解37ug DNA的酶量。标准反应体系是： 1mg/mL的超声 打断的DNA片段，50mMTris-HClpH8.0，0.1 mg/mL BSA, 1mMMgCl ，37℃保温。 2 运输及保存 低温运输、-20℃保存，有效期两年。注意：不能放在-70℃保存。 使用方法 一、酶的稀释 本产品浓度为 1U/uL，如果需要稀释Benzonase，需要自备酶稀释液， 稀释液的配方是：50mMTris-HClpH8.0，20mMNaCl，2mMMgCl 。 2 在稀释液中的Benzonase只能在4℃放置数天。 二、用于去除核酸的标准试验（用户可以以此为参考设计自己的实验） 将500ng鲑鱼精DNA溶解在50mMTris-HClpH8.0，1mMMgCl ， 2 0.1mg/mL BSA 中，然后加入90U 的Benzonase，37℃保温4小时，