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Subchondral fracture after ischemic osteonecrosisof the immature femoral head in piglet model进行该实验研究以研究使用仔猪模型的未成熟股骨头的缺血性骨坏死后软骨下骨折的发展。 在将结扎紧紧地放置在股骨颈周围以破坏股骨头的血液供应之后,研究了48只雄性仔猪。 在局部缺血诱导后2-8周对动物实施安乐死。进行射线照相,组织学和组织形态学评估。 在缺血性坏死的初始放射照相阶段的32个梗死的股骨头中的12个(38%)中观察到软骨下骨折。 骨折主要见于那些血运重建和修复开始的初始阶段的股骨头。组织形态计量评估显示,与对侧正常头相比,梗塞股骨头的软骨下区域的小梁厚度和体积减小。 在缺血性骨坏死后,软骨下区域中的小梁骨更薄,并且由于缺乏新的骨形成而存在更少的骨体积。 这项研究的结果支持这一假设,未成熟股骨头的软骨下骨折发展为软骨下区域中的小梁骨结构改变的结果。Introduction新月形软骨下射线可见线的出现是Legg-Calve-Perthes病[1,2]中最早的放射学标志之一。 导致新月体征的软骨下骨折的发展被认为是从真性形态区分潜在perthes病形式的关键病理学事件[3,4]。 虽然已经对在髋关节置换术时获得的梗塞的成年股骨头进行了广泛的研究[5-9],但是由于缺乏病理标本的可用性,对未成熟的股骨头也不可能进行类似的研究。 结果,未成熟股骨头缺血性坏死后这一重要事件的意义仍不清楚。Salter [3]和Salter和Thompson [4]提出,在Perthes病中,软骨下骨折的发生是坏死骨再吸收的结果,并且在梗塞的骨性骨骺骨化后恢复扁织骨。 据信,修复过程通过产生编织骨而削弱软骨下区域的承重能力,所述编织骨在受到与正常有力活动相关的负荷时断裂。 据我们所知,在文献中只有一项研究提出了关于未成熟股骨头中软骨下骨折发展的所有科学数据。在缺血性坏死的仔猪模型中,Douglas和Rang [10]在血管再生的部位观察到软骨下骨折。 他们没有报告骨吸收或编织骨形成是否与骨折的发展相关。 除了这些数据,缺乏数据来支持或反驳缺血性骨坏死后未成熟股骨头中软骨下骨折的所提出的机制。由于软骨下骨折的发展可能是预示由于缺血性骨坏死而复杂的perthes病和其他髋部病变中的股骨头畸形的发展的关键事件,因此定义有助于其发展的过程是重要的。 定义这些过程可能揭示潜在的治疗策略,可以早期应用以防止股骨头畸形的发展。 因此,我们使用仔猪模型进行详细的射线照相和组织学研究,以调查未成熟股骨头的缺血性骨坏死后软骨下骨折的发展。Materials and methods实验研究由机构动物护理和使用委员会批准。 使用4-6周龄(6-9kg)的雄性约克夏小猪。 如前所述[11],通过手术将结扎线紧紧地放置在股骨颈周围来诱发股骨头骨骺的缺血性骨坏死。 所有动物用戊巴比妥过量安乐死。在诱导局部缺血后,在第2周处死10只动物,在第3周处死3只动物,在第4周处死12只动物,在第6周处死3只动物,并在第8周处死20只动物。 切除近端股骨,并使用Faxitron Cabinet X射线系统(Hewlett-Packard,McMinville,Oregon,USA)作为整体进行射线照相。 然后使用精密圆形金刚石锯(Isomet 1000; Buehler,Lake Bluff,Illinois,USA)将股骨头在冠状面中切成3mm厚,并进行射线照相以产生断层图像。 将对侧作为对照。Histological procedure将股骨头部分在真空下固定在10%中性缓冲福尔马林中。 组织学切片的产生和检查,如前所述[11,12]。 将来自每个头部的一半切片转移到EDTA溶液中用于脱钙和石蜡包埋。 将剩余的部分置于一系列用于甲基丙烯酸甲酯包埋的分级乙醇溶液中。 将石蜡块切成5mm厚并用苏木精和曙红染色。 将塑料块在雪犁切片机上切成4mm厚,并根据von Kossa和McNeals四色染色用5%硝酸银染色。Histomorphometry用von Kossa和McNeal的四色染色染色的切片用于确定美国骨和矿物研究学会采用的小梁指数[13]。 使用来自每只动物的股骨头的中心区域的代表性切片。 为了根据平行板模型确定小梁骨体积,组织体积,小梁分离,小梁厚度和小梁数, 使用Bioquant图像分析系统(Bioquant Image Analysis Corporation,Nashville,Tennessee,USA)测量组织面积,骨面积和小梁周长。根据美国骨与矿物研究协会[13]批准的指南计算得到的指数。 在距软骨 - 骨连接处1mm的距离内进行测量,以在骨骺的软骨下区域中包括初级和次级海绵。Stati
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