第13章核酸化学.PPT

* * 第十三章 核酸化学 * * 1、tRNA的结构 种类：60多种 含量：占总RNA的10％～15％ 作用：选择性转运氨基酸的工具 一级结构特点： 含有稀有碱基， 3/末端为CCA-OH结构（连接氨基酸） 第十三章 核酸化学 * * tRNA的二级结构 四臂四环 氨基酸臂：－CCA-OH，接受氨基酸 反密码环：识别密码子 第十三章 核酸化学 * * tRNA的三级结构 连接氨基酸 与密码子配对 第十三章 核酸化学 * * 2、mRNA的结构 占总RNA5％，种类多 密码子：5‘→3’方向每相邻三个碱基组成的三联体，代表一个氨基酸。 作用：蛋白质合成的直接模板 第十三章 核酸化学 * * 5’ 3’ …………AUG……………………………… 富含嘌呤碱序列——SD序列 （与核糖体结合部位） 原核生物 第十三章 核酸化学 * * 5/端为m7GpppNm的帽子结构 3/端为poly A（200个）尾巴 m7Gppp AUG GUG ……………… UAA AAA ……An 5′ 3′ 5 ′帽子结构 密码子 3 ′多聚A尾 真核生物 第十三章 核酸化学 * * mRNA的5?帽子结构—m7GpppNm 5? 5? 第十三章 核酸化学 * * 3、核蛋白体RNA（rRNA）的结构 占总RNA80％ 与蛋白质结合形成核蛋白体，是蛋白质生物合成场所 核蛋白体有大、小两个亚基组成 第十三章 核酸化学 * * 70S 80S 50S 30S 60S 40S 31 proteins 23S RNA 5S RNA 21 proteins 16S RNA 49 proteins 28S RNA 5.8S RNA 33 proteins 18S RNA 原核 真核 大亚基 小亚基 大亚基 小亚基 第十三章 核酸化学 * * 第十三章 核酸化学 * * 第三节 核酸的理化性质 一、核酸的紫外吸收 最大吸收峰 ：260nm吸收 （嘌呤与嘧啶中的共轭双键） 第十三章 核酸化学 * * 纯 DNA A260/A280 ≈ 1.8 纯 RNA A260/A280 ≈ 2.0 样品中含有杂蛋白及苯酚，比值降低 核酸降解，比值升高 测定核酸样品的A260/A280比值，判断核酸样品纯度 第十三章 核酸化学 * * 二、核酸的变性、复性、杂交 1.核酸的变性：在某些理化因素作用下（温度、酸碱、有机溶剂、尿素等），核酸分子互补双链之间氢键断裂，使双螺旋结构松散变成单链的过程。 2.核酸的复性：又称退火，变性核酸在一定条件下如温度逐步恢复到生理范围内，两条互补链重新恢复天然的双螺旋构象。 第十三章 核酸化学 * * 核酸的变性 核酸的复性 第十三章 核酸化学 * * 增色效应：核酸在变性过程中260nm波长吸收值（ A260 ）增加 减色效应：核酸在复性过程中260nm波长吸收值（ A260 ）减小 第十三章 核酸化学 * * DNA加热 50%DNA发生变性 此时的温度——熔点 Tm 解链温度 变性温度 第十三章 核酸化学 * * 3. 核酸分子的杂交 退火 不同来源的核酸经变性和复性的过程，其中一些不同的核苷酸单链由于存在局部碱基互补片段，而在复性时形成杂化双链，此过程称分子杂交。 加热 第十三章 核酸化学 * * ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 分子探针:带有某种标记物的分子，如核苷酸链片段 退火 加热 第十三章 核酸化学 第十三章 核酸化学 第十三章 核酸化学 第13章 核酸化学 生化教研室 夏花英 8403 课程代码：22680b57e1 * * DNA（脱氧核糖核酸） RNA（核糖核酸） mRNA（信使RNA） tRNA（转运RNA） rRNA（核糖体RNA） 核酸 deoxyribonucleic acid ribonucleic acid messenger transfer ribosomal 第十三章 核酸化学 * * 脱氧核糖核酸（DNA）：遗传信息的载体 rRNA ： 蛋白质合成场所 核糖核酸（RNA） tRNA： 转运氨基酸工具