猪链球菌2型菌毛骨架蛋白编码基因SSU2101要点.PDFVIP

微生物学通报 AUG 20, 2010, 37(8): 1176−1181 Microbiology China © 2010 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 猪链球菌 2 型菌毛骨架蛋白编码基因 SSU2101 敲除突变株的构建及其生物学功能 1,2 1,2 1,2 1 1,2* 秦跃红 王长军 陈红娜 潘秀珍 唐家琪 (1. 南京军区军事医学研究所 江苏 南京 210002) (2. 南京医科大学基础医学院 江苏 南京 210029) 摘 要: 利用同源重组基因敲除方法构建猪链球菌2 型(Streptococcus suis serotype 2, S. suis 2) 中国 强毒株05ZYH33 菌毛骨架蛋白(Backbone protein, BP)编码基因SSU2101 敲除突变株。采用引物特 异性 PCR 分析、Southern 杂交及RT-PCR 等方法鉴定, 证实成功构建了 BP 基因缺失突变株。生 物学特性显示, 突变株的菌落形态、溶血活性以及染色特性方面与野生株之间均无明显差异。小 鼠致病性试验结果显示, 突变株的毒力比野生株显著减弱。研究结果提示菌毛在S. suis 2 感染致 病过程中起重要作用, 为系统研究S. suis 2 菌毛分子装配机制及其生物学功能奠定了基础。 关键词: 猪链球菌2 型, 菌毛骨架蛋白, 基因敲除, 致病性 Construction and Characterization of Pilus Backbone Gene Knock-out Mutant of Streptococcus suis Serotype 2 QIN Yue-Hong1,2 WANG Chang-Jun1,2 CHEN Hong-Na1,2 PAN Xiu-Zhen1 TANG Jia-Qi1,2* (1. Institute of Military Medical Sciences, Nanjing Command, Nanjing, Jiangsu 210002, China) (2. School of Basic Medical Sciences, Nanjing Medical University , Nanjing, Jiangsu 210029, China) Abstract: Based on the principle of homologous recombination, we construct gene knock-out mutant of the pilus backbone gene in Streptococcus suis serotype 2 virulent strain 05ZYH33. PCR analysis, Southern hybridization and RT-PCR analysis showed that the target gene was replaced by SpcR cassette. Analysis of biological characteristics showed