白蛋白百分含量不同时两种方法测定尿总蛋白结果的差异论文.docVIP

　　白蛋白百分含量不同时两种方法测定尿总蛋白结果的差异论文 陈筱菲，邓焕柱，刘存丽，郑佳音 【摘要】 目的: 比较尿白蛋白百分含量不同时用邻苯三酚红钼法（PRM）和苄乙氯铵法（BEC）测定尿总蛋白结果的差异。方法：利用琼脂糖凝胶普通电泳分析尿蛋白组分，然后比较PRM法和BEC法测定94例实验标本的尿总蛋白的结果；同时总结2 154例阳性尿液的白蛋白百分含量。结果：白蛋白百分含量为96%～100%、81%～95%、66%～80%、51%～65%、31%～50%、10%～30%和＜10%的7组中，两法测定结果的相对偏差分别为10.0%、4.5%、6.6%、14.9%、21.7%、53.0%和65.2%，BEC法测定结果偏低。统计显示白蛋白含量大于66%时两法测定结果无明显差异，白蛋白小于65%时差异有显著性。在所有2 154例阳性尿液中.freelin using Pyrogallol Red-molybdate method (PRM) and benzethonium chloride method (BEC). Methods ：Analyze urine protein fraction ples marize and analyze the percentage of albumin of 2154 proteinuria. Results：Relative bias betethods in percentage being 96%～100%，81%～95%，66～80%，51%～65%，31%～50%，10%～30% and＜10%. The urine protein values obtained ed no remarkable difference ethods for the determination of urinary total protein in content in content ples had albumin content betin content 66%～95%，and only 9.8% had albumin content under 65%. Conclusion ：The percentage of albumin content under 65% in all samples is about 10%. This portion shoethods for the determination of urinary total protein. Key olybdate; benzethonium chloride 尿总蛋白测定在肾脏疾病等的诊断、鉴别诊断和治疗监测等方面都具有非常重要的价值。尿液总蛋白中有多种蛋白组分，正常及病理情况下总蛋白浓度和组分变异都很大，虽然测定方法较多，但常规工作中准确测定并不容易。目前常规应用最多、性能较好的是邻苯三酚红钼（PRM）法和苄乙氯铵（BEC）法1-3，但两法测定原理完全不同，因此测定结果存在差异，而且这种差异在尿蛋白组成不同时可有较大变化。由于长期以来对尿蛋白组成缺乏方便有效的检测手段，因此缺乏该两法测定尿总蛋白的差异情况分析。我们利用Helena全自动电泳仪做尿蛋白普通琼脂糖凝胶电泳（AGE）将尿蛋白做组分分析，并以白蛋白百分含量进行分组，再分析比较不同白蛋白百分含量时PRM法和BEC法对尿总蛋白测定结果的差异情况。 1 材料和方法 1.1 对象 收集2006年4月至2007年11月间本院门诊和住院做尿蛋白电泳检测的所有3 143例患者尿液；选取其中2007年7～8月间白蛋白百分含量不同的94例为尿总蛋白测定实验标本，-40 °C冰冻保存。测定前将尿标本取出融化，颠倒混匀，5 °C下3 000 r/min离心。每例患者尿标本检测均已取得被检者的知情同意。 1.2 仪器 SPIFE3000全自动电泳仪（Helena），日立7600全自动生化分析仪。 1.3 试剂 尿蛋白AGE试剂为REP Urine Protein Kit（helena），包含REP Urine Protein Gel和考马斯亮蓝浓缩染色液，自配漂洗液为冰醋酸:甲醇:水（2:1.5:6.5）；浓缩染色液以漂洗液10倍稀释后使用。尿总蛋白试剂盒：PRM法所用购自北京利德曼生化技术有限公司，BEC法所用来自罗氏诊断产品有限公司，校准液均为稀释的罗氏血清混合校准液。 1.4 方法 1.4.1 尿蛋白AGE：加样槽上每孔加尿液17μl，仪器自动重复加样3次，电泳16 min，62 ℃干燥12 min；之后于染色缸中染色10 min，漂洗3次，70 ℃干燥8 min；凝胶片在扫描仪中采用专用的电泳扫描软件，得到电泳区带图谱和扫描峰图。 1.4.2 尿