磁弹性无线传感器检测不同液体介质中的金黄色葡萄球菌论文.docVIP

　　磁弹性无线传感器检测不同液体介质中的金黄色葡萄球菌论文 黄思静 汪义杰 蔡青云 方建德 【摘要】 研制了磁弹性金黄色葡萄球菌无线传感器，用于检测不同液体介质中的金黄色葡萄球菌。取0.2 mL一定浓度菌液加到含2 mL无菌液体介质的检测玻璃管中，磁弹性传感器共振频率随细菌的生长而改变。通过改变牛肉膏和蛋白胨的浓度，得出传感器在含有2×105 cells/mL金黄色葡萄球菌的培养基CM 2-2中共振频率响应最大。结果表明，此传感器可以测定的金黄色葡萄球菌浓度范围在CM 2-2中是3×103~2×107cells/mL，在牛奶中是1×104~2×107 cells/mL，检出限分别是１×103 cells/mL和１×104 cells/mL。传感器共振频移大小与金黄色葡萄球菌的浓度呈线性相关关系，相关系数在牛奶中是0.98.freelagoelastic Staphylococcus aureus(S.aureus) edium.After 0.2 mL bacteria L liquid medium，the resonance frequency of magoelastic sensor changed ost frequency response in culture medium CM2-2 incubated L S.aureus.The results indicated that this sensor can be used to determine S.aureus concentrations of 3×103 to 2×107cells/mL in culture medium and 104 to 107 cells/mL in milk，its of 103 cells/mL and 104 cells/mL，respectively.The sensor frequency shift ic value of the S.aureus concentration，and the correlation coefficient ilk and 0.99 in culture medium. Keyedium； Ｍilk 1 引言 金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus）是一种重要的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、心包炎等，甚至导致败血症、脓毒症等全身感染1，因此，检测金黄色葡萄球菌具有实际意义。目前，检验该菌的方法主要有血浆凝固酶试验2， 检验金黄色葡萄球菌肠毒素采用血清学反应3、直接落射荧光滤膜技术4、生物发光法5、压电石英晶体技术6等，这些方法中检测器都需要与电源连接，不能进行无线检测。 近年来，一种新型无线磁弹性传感器得到迅速发展7~18。图1a为传感器工作原理：在外加交变磁场中，传感器产生磁致伸缩。当外加交变磁场频率与传感器振动频率相等时，传感器产生共振，对应的振动频率为传感器共振频率。当传感器表面性质发生变化，其共振频率随之改变。其伸缩振动产生的磁通可由检测线圈检测到，从而实现无线传感7。目前，这种传感器已在遥感监测胃液pH值8、葡萄糖浓度9、湿度10、内毒素11、磷酸酯酶12、有机磷农药13、血液凝结14等方面得到广泛应用。基于抗体与抗原结合构成的磁弹性免疫传感器，用于检测沙门氏菌15、大肠杆菌16等。还有表面无任何化学及生物修饰的磁弹性传感器用于结核杆菌17、大肠杆菌18的生长实时检测。 本实验研制了一种磁弹性金黄色葡萄球菌无线传感器，用于检测金黄色葡萄球菌。将传感器置于含有细菌的液体介质中，对细菌进行实时在线定量检测。这种无线无源磁弹性传感器基于传感器对溶液性质（主要是粘度）改变的响应，可直接检测不同液体介质中的金黄色葡萄球菌含量。 2 实验部分 2．1 仪器与试剂 磁传感器是一种带状非晶态铁磁合金2826MB（Fe40Ni38Mo4B18，美国Honeym×6 mm×28 μm，修饰前在空气中的共振频率约为105 kHz； 磁弹性传感器检测装置为实验室自制（见图1b）； LRH-250A 型生化培养箱（广东省医疗器械厂）；DSX-280A 手提式压力蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂）；乌氏粘度计（上海申立玻璃仪器有限公司，直径0.53 mm）；S 1配制 大豆肉汤（Trytic Soy Broth，TSB）培养基的成分是：胰蛋白胨3.4 g，植物胨0.6 g，葡萄糖0.5 g，K2HPO4 0.5 g，NaCl 1 g，二次蒸馏水200 mL，用1 mol/L NaOH调pH至7.3，121 ℃高压灭菌20 min。将金黄色葡萄球菌接种至已灭菌的TSB中，在37 ℃培养箱中培养18 h后放入冰箱，4 ℃条件下保存备用。用传统平板记数法测得菌