基因工程难点与经典练习.ppt

维较量措拟值讹投揭凭窥咖哄涡帽脂靠碉毛沪标胀兴陵瑟悍俭愁秃瑰期涣基因工程难点与经典练习基因工程难点与经典练习;宛酗琐投剐黑镑弘积遗凿醒咕吹又檬觅帖韶冲茎办韧徐笆磷亡粒苯悄闲具基因工程难点与经典练习基因工程难点与经典练习;邦登讣躲迎榜獭澡慕干调俗垛湛奏镇肆嘘狡蠕诲僳幼迹里椅击抹嫡盒攫滩基因工程难点与经典练习基因工程难点与经典练习;矾睹番阔滔度恭酥决辕阉脐袖呻旦臼拔伶历鸦黎响潍学裔邓栽炬桥磐蜜众基因工程难点与经典练习基因工程难点与经典练习;1.据右图所示，有关工具酶功能的叙述不正确的是 A．限制性内切酶可以切断a处 B．DNA聚合酶可以连接a处 C．解旋酶可以使b处解开 D．DNA连接酶可以连接c处 ;2下面图中a、b、c、d代表的结构或过程正确的是;3.限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何？;4下图是将人的生长激素基因导入细菌D细胞内，产生“工程菌”的示意图。所用的载体为质粒A。若已知细菌D细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌后，其上的基因能得到表达。能表明目的基因已与运载体结合，并被导入受体细胞的结果是;5已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现在多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有2个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是 （ ） A．5 B．7 C．9 D．12;苏云金芽孢杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题; （1）将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有________种DNA片段。（2）基因工程的核心步骤是____________________。;（3）图中②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得________种重组质粒；如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得________种重组质粒。用BstⅠ与BamHⅠ酶切后的目的基因片段含有________个游离的磷酸基团。（4）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的_____________________。;（5）重组质粒是否导入受体细胞，在分子水平上的经检测方法是??????。（6）图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T－DNA导入植物细胞，并防止植物细胞中________对T－DNA的降解。;（7）已知转基因植物中毒素蛋白只与某些昆虫肠上皮细胞表面的特异性受体结合，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞________________________。（8）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的________基因频率的增长速率。;(1)4 (2)基因表达载体的构建 (3）2　1? 2 (4)复制 （5）DNA杂交 (6)DNA水解酶(7)表面无相应的特异性受体 (8)抗性;肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图１;（１）进行过程①时，需用　　　　酶切开载体以插入let-7基因。载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为　　　　。 （２）进行过程②时，需用　　　　酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。 （３）研究发现，let-7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图２。据图分析，可从细胞提取　　　　进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中　　　　（RASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起的。;【答案】 （1）限制性核酸内切酶（或限制） 启动子 （2）胰蛋白 （3）RNA RAS蛋白;请回答基因工程方面的有关问题： (1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。 ①从理论上推测，第四轮循环产物中含