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病毒基因组DNA提取试剂盒使用说明书
病毒基因组DNA提取试剂盒
Virus Genomic DNA Kit
(目录号:HS0307)
产品包装
试剂盒成分 50 preps Buffer GB 15 ml Buffer GD 30 ml Buffer PW 60 ml Buffer EB 10 ml Proteinase K 1 ml Spin Columns CG* 50个 Collection Tubes (2 ml) 50个 自备试剂
无水乙醇
储存条件室温(~ 25℃)DNA。无需使用苯酚、氯仿等有机溶剂抽提,独特的液/蛋白酶K迅速裂解蛋白酶K,在高盐状态下DNA选择性吸附于硅基质膜再通过快速的漂洗离心步骤去除蛋白等,最后低盐的洗脱缓冲液将DNA从膜上洗脱。PCR、RT-PCR、Real-Time PCR、印迹等分子生物学实验。
产品特点
1.简便快速,1小时内可获得高纯度的病毒基因组DNA。
2.无需有机溶剂抽提,使用安全。
3.重复性好,产量高。
4.所得病毒DNA纯度高,无污染物和抑制剂,方便下游应用。
注意事项
1.血清或血浆避免反复冻融,否则会使蛋白变性或产生沉淀,导致提取的DNA片段小,提取量下降。
2.如缓冲液Buffer GB、Buffer GD结晶或产生沉淀,可在56℃水浴溶解。
3.所有离心步骤均为室温下操作。
操作步骤1.5 ml离心管(自备),加入ul的Proteinase K溶液。
2. 向离心管中加入200 ul血清或血浆,然后再加入200 ul Buffer GB,涡旋震荡15 sec。
(注意:1、样本体积不足200 ul可以加入0.9% NaCl(自备)补足。2、为确保样本有效裂解,加入Buffer GB后,需将样本与Buffer GB充分混匀。)
3.56℃孵育15 min,短暂离心,将管壁上的溶液收集到管底。
4. 加入250 ul无水乙醇,涡旋震荡15 sec,室温放置5 min,短暂离心,将管壁上的溶液收集到管底。
(注意:如果环境温度超过25℃,无水乙醇应在冰上预冷后使用。)
5.将一个Spin Columns CG*放入Collection Tubes(2 ml)中,将上离心柱中离心,弃收集管中的废液。加入500 u的B,离心,弃收集管中废液。Buffer GD中含有乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发)
7. 向吸附柱内加入00 ul的B,离心,弃收集管中废液。DNA纯度,可重复步骤7一次Buffer PW中含有乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发)
8.向吸附柱中加入500 ul无水乙醇,10 000 rpm离心30 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9.室温12 000 rpm离心3甩干残留液体。将离心柱置于新的1.5 ml离心管(自备)中,3 min,使吸附膜完全变干。加入ul的洗脱液,室温放置2min。离心1 min,离心管底溶液即DNA。 ~ 60℃预热。如需使用去离子水洗脱,可用NaOH调整其pH值在7.0 ~ 8.5之间,为了增加DNA回收率,可将得到的溶液重新加入到离心管中,室温放置2 min,再次离心收集)
北京厚生博泰科技有限公司
Beijing Hooseen Biotech Co., Ltd.
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