电化学发光原理及优势.pdf

电化学发光 原理及优势 Ajry Zhou 电化学发光原理  电化学发光免疫测定ECLIA Electro chemi luminescence immuno assay 是电化学发光 （ECL ）和免疫测定相结合的产物。 它的 标记物的发光原理与一般的化学发光 （CL ）不同，是一种在 电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，实际上包括 了电化学和化学发光二个过程。ECL与CL 的差异在于ECL是 电启动发光反应，而CL是通过化合物混合启动发光反应。 ECL 不仅可以应用于所有的免疫测定，而且还可用于DNA ／ RNA探针检测。 是继放射免疫(RIA)、酶免疫(EIA)、荧光免疫(FIA)、化 学发光免疫(CLIA)测定以后的新一代标记免疫测定技术。 电化学发光技术 ElectroChemiLuminescence (ECL) 结合 结合磁 转移至 施加电压 信号检测 标记抗体 性微珠 电极 启动反应 ECL 是罗氏在免疫检测方面的专利技术。 ECL 技术配以精心设计的免疫试剂，使得 罗氏能够给出精确而敏感的检测结果。 ECL 反应的过程: – 标记Ruthenium 的高特异性抗体与被测物结合后 与顺磁性微珠结合 – 利用磁场吸附磁性微珠;用ProCell溶液将结合了 磁性微珠的抗原抗体复合物与未结合的组分分 离。 – 施加电压启动反应 – 用光电倍增管检测发射光信号 – 发射光信号与被测物浓度成线性关系 电化学发光底物- 三联吡啶钌N羟基琥珀酰胺(NHS)酯 抗原抗体结合 免疫复合物的形成 第一抗体标记生物 抗体 素（与微磁珠结合） 抗原 第二抗体标记 Ruthenium （产生光 信号） 生物素 两种抗体皆能与靶 Ruthenium 抗原特异性结合 免疫复合物 抗体 Source: Roche Diagnostics Research and Development 夹心法反应 竞争法反应 生物素－链霉亲和素特异性亲和 作用 磁性微珠 生物素与链霉素特异