水产品中孔雀石绿残留免疫胶体金快速检测试剂盒的优化.pdfVIP

试验总结/Test Summary 文章编号：1006-3188（2017）01-0031-05 水产品中孔雀石绿残留免疫胶体金 快速检测试剂盒的优化 1 1 1 1 2 2 孟霞 谢世红 银旭红 刘彬 胡叶军 桑丽雅 （1. 江西省水产品质量安全检测中心，江西南昌 330000 ； 2. 浙江杭州南开日新生物技术有限公司，浙江杭州 310022 ） 摘要：针对现有的孔雀石绿免疫胶体金快速检测试剂盒在水产品孔雀石绿和隐性孔雀石绿残留检测中存在前处 理复杂、检测时间偏长、灵敏度达不到检测要求等问题。对样品处理中的提取剂、净化剂及胶体金试剂板组分进行 了优化。优化后试剂盒的检测时间从 40 分钟缩短到 20 分钟之内 ，检测限从 3.0μg/kg 降低到 2.0μg/kg，检测准确 度也提高到假阳性和假阴性率均小于 5%。 关键词：孔雀石绿；隐性孔雀石绿；水产品；样品前处理；胶体金 中图分类号：S91 文献标识码：B 孔雀石绿因其良好的抗真菌病疗效，一直以来 进行了优化研究，大大缩减了试剂盒的检测时间，降 被广泛用于水产动物的水霉病、鳃霉病和小瓜虫病的 低了检测限，提高了检测准确度，以实现免疫胶体金 [1] 预防和治疗中 。但孔雀石绿及其代谢物隐性孔雀石 快速检测法在水产品质量安全快速检测中的更广泛 绿容易在动物体内高残留，有致癌致畸致突变的副作 应用。 [2] 用 。世界上诸多国家已将孔雀石绿列为禁用药，中 国在2002年5月发布的(农业部第193号公告) 《食 1 材料与方法 品动物禁用的兽药及其化合物清单》中也明确规定孔 1.1 材料与试剂 雀石绿为禁用药，在动物源食品中不得检出。 1.1.1 材料 目前水产品中孔雀石绿残留检测方法主要有 草鱼、鲫、鳙、鳜、鲶、黄鳝、甲鱼、螃蟹、 [3] 高效液相色谱法 (HPLC) 、液相色谱串联质谱法 南美白对虾，购于超市；鱼去鳞去皮，取肌肉部分； [3] [4-6] (LC-MS/MS) 、免疫胶体金快速检测法等 。液 甲鱼、螃蟹取肌肉部分；虾去头、壳、肠腺，取肌肉 相色谱串联质谱法定量精确，但相对耗时长、成本高； 部分。样品100g，剪碎，用均质机均质。 新近发展起来的免疫胶体金快速检测法虽然所需仪 1.1.2 试剂 器设备条件要求不高，所需时间相对较少，但还是存 孔雀石绿 (MG) 、隐性孔雀石绿 (LMG)：德国 在前处理复杂、检测时间偏长、灵敏度达不到检测要 Dr.Ehrensorfer 公司；盐酸羟胺、对甲苯磺酸、乙 求等问题。 酸铵、中性氧化铝、氯化钙、四氯苯醌、乙腈、正己 针对此情况，本文对现有的孔雀石绿免疫胶体 烷(均为分析纯)： 国药集团化学试剂有限公司；孔 金快速检测试剂盒前处理方法